(FBIOyF) Producción de Grado - Tesinas, Residencias Educativas, Trabajos Finales
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Ítem Acceso Abierto Evaluación de una proteína de Trypanosoma cruzi como posible marcador diagnóstico(2021) De Hernández, María Azul; Cribb, Pamela; Villar, Silvina Raquel; https://orcid.org/0000-0001-9285-385XLa proteína High Mobiliy Group B de Trypanosoma cruzi (TcHMGB), al igual que otros miembros de la familia HMGB, participa en importantes procesos nucleares por su capacidad de alterar la estructura de la cromatina. Más allá de sus funciones nucleares, en mamíferos, la proteína HMGB1 (mHMGB1) puede ser secretada al medio extracelular bajo condiciones de estrés celular y actuar como “patrón molecular asociado a daño” (DAMP) mediando procesos inflamatorios. Mediante ensayos in vitro e in vivo, observamos que TcHMGB es capaz de inducir una respuesta inflamatoria y es detectada en cortes de tejido de un modelo de infección murino con la cepa Tulahuén de T. cruzi, tanto en células infectadas como en la región extracelular, lo que sugiere que TcHMGB sería secretada durante la infección. A partir de estos antecedentes, decidimos evaluar su potencialidad como marcador de la infección y su posible aplicación para el diagnóstico de la enfermedad de Chagas. En primer lugar, se realizó un análisis bioinformático de distintos aspectos del gen y de la secuencia proteíca de TcHMGB utilizando la base de datos TritrypDB y diferentes programas. Se recopiló así, información valiosa acerca de su localización genómica, los niveles de expresión durante el ciclo de vida del parásito y arquitectura de dominios conservados entre sus ortólogas. Con el uso de predictores, determinamos que la proteína TcHMGB posee sitios conservados que podrían sufrir modificaciones postraduccionales (MPTs) afectando su localización celular, de manera análoga a lo observado en su ortóloga de mamíferos (mHMGB1). Con el fin de estudiar el comportamiento de TcHMGB y mHMGB1 durante una infección in vivo, en una primera etapa, caracterizamos un modelo de infección animal con la cepa Dm28c de T. cruzi. Este modelo no resultó letal para los animales y éstos presentaron un curso de infección con parasitemias elevadas y afección cardíaca y esplénica, los cuales evolucionaron favorablemente tras superar el pico de parasitemia. Por último, estudiamos la especificidad de anticuerpos comerciales anti-mHMGB1 y se determinó que no reconocen inespecíficamente a la proteína del parásito, por lo que serán útiles en ensayos futuros para el reconocimiento de mHMGB1 en las muestras sin interferencias generadas por TcHMGB.Ítem Embargo Datos multivariados aplicados al control alimenticio(2024) Camargo, Gonzalo; Pagani, Ariana PaulaEl consumo de jugos de arándanos ha aumentado en los últimos años debido a sus beneficios para la salud. Los arándanos son ricos en antocianinas, un pigmento natural con capacidad antioxidante, razón por la cual son muy favorables para la prevención de ciertas enfermedades. Las antocianinas son responsables del color rojo-púrpura de los jugos y un indicador de su calidad. La estabilidad de las antocianinas puede verse afectada por factores como el pH, la temperatura, la luz y la exposición al oxígeno, lo que provoca decoloración y reduce sus beneficios para la salud. La inestabilidad de los jugos de arándanos es un problema significativo que afecta la calidad del producto. También existe la posibilidad de que los jugos comerciales estén adulterados con colorantes con el fin de enmascarar la deficiencia de antocianinas. En este trabajo, se analizaron muestras de jugos comerciales de arándanos para evaluar su calidad y detectar posibles adulteraciones. Para este propósito, se emplearon señales espectrofotométricas moduladas por un gradiente de pH y se utilizaron técnicas cualitativas de quimiometría para el modelado de los datos multivariados. Los datos se procesaron mediante distintas versiones del algoritmo SIMCA (Soft independent modelling of class analogy), un método de modelado de clases que permite determinar la autenticidad de una muestra. Como resultado se obtuvo un método sencillo, económico y con muy poca generación de residuos de solventes orgánicos, capaz de verificar la legitimidad y estándares de calidad en este tipo de productos comerciales.Ítem Embargo Efectos de partículas ambientales recogidas en zonas aledañas a las industrias aceiteras como agente de toxicidad física sobre la funcionalidad de macrófagos humanos en cultivo(2025-07-03) Buccolini, Lara; Bongiovanni, Bettina; Diab, Magdalena NievesLa contaminación del aire representa un desafío ambiental y sanitario global, siendo el material particulado (PM), especialmente el PM 2,5, uno de los contaminantes más perjudiciales por su capacidad de penetrar profundamente en el sistema respiratorio e incluso alcanzar el torrente sanguíneo. El Área Metropolitana del Gran Rosario (AMGR), una región marcada por una intensa actividad agroindustrial, se han documentado concentraciones elevadas de material particulado (PM) en zonas próximas a industrias aceiteras. Esta situación podría traducirse en un riesgo sanitario relevante, tanto para la población residente como para los trabajadores que se desempeñan en dicho entorno. El presente trabajo tuvo como objetivo evaluar los efectos inmunotóxicos del material particulado ambiental recolectado en zonas aledañas a una planta aceitera sobre la funcionalidad de macrófagos humanos derivados de la línea celular THP-1 en cultivo. Para ello, se empleó un dispositivo portátil de muestreo para recolectar partículas suspendidas en el aire durante diferentes meses del año. Las muestras fueron caracterizadas e incorporadas a cultivos celulares mediante dos enfoques experimentales: en concentraciones fijas, con el fin de analizar el impacto de las propiedades fisicoquímicas del PM (tratamiento tipo I); y en volúmenes fijos, para evaluar el efecto de la cantidad de material recolectado en cada momento (tratamiento tipo II). Se llevaron a cabo estudios de viabilidad celular mediante ensayo MTT, análisis de expresión génica por qPCR de genes relacionados a inflamación [P105 (NFκB1), iκBα, iκBβ, NLRP3, CD80, iNOS e IL-1β], y cuantificación de citocinas proinflamatorias (IL-1β e IL-6) por EIA. Los hallazgos encontrados sugieren, por un lado, que el PM recolectado induce una respuesta inflamatoria temprana, mediada por la vía de señalización dependiente de NF-κB y, por otro lado, que tanto las características fisicoquímicas como el momento de su recolección podrían influir de manera diferencial en la activación de respuestas inflamatorias. Asimismo, las concentraciones de PM superaron los valores guía de la OMS, aunque permanecieron dentro de los límites legales provinciales, lo que evidencia una normativa local permisiva y desactualizada frente a los estándares internacionales. Cabe destacar que la legislación de Santa Fe aún no establece valores límite para PM2.5, a pesar de la existencia de recomendaciones internacionales al respecto. En suma, la investigación brinda evidencia científica que respalda la necesidad de un control más riguroso de la calidad del aire en zonas industriales y de medidas de protección para las poblaciones expuestas. En este marco, el AMGR, con una fuerte base agroindustrial, enfrenta un patrón de contaminación característico y el desafío urgente de avanzar hacia un desarrollo sostenible que no comprometa la salud ni el ambiente.Ítem Embargo Auditorías como herramientas de control de la inocuidad alimentaria. Elaboración de un plan de auditorías de primera parte para ser aplicado en los Comedores Universitarios de la Universidad Nacional de Rosario.(2025-06-06) Guibert, Eloisa Milagros; Bruguezi, César; D'Andrea, FlorenciaLa producción de alimentos sin las Buenas Prácticas de Manufactura (BPM) pone en riesgo la calidad de los productos elaborados y la seguridad de los consumidores. El ejemplo más claro es la posible aparición de brotes de enfermedades transmitidas por alimentos (ETAs). Por lo tanto la aplicación de las BPM, como así su corrección resulta crucial. Las auditorías internas realizadas por el departamento de bromatología de los Comedores Universitarios (CU) se presentan como una estrategia para asegurar su correcta implementación, teniendo la higiene como pilar fundamental. Durante mi trabajo de auditorías se me permitió visitar y conocer en profundidad todos los establecimientos pertenecientes a la Universidad Nacional de Rosario, que se encargan no solo del expendio de productos alimenticios, sino también de su elaboración, almacenamiento, recepción y transporte. Estos no se encuentran distribuidos solo en la ciudad de Rosario, sino que también en sus alrededores. En las visitas realizadas, tuve el gusto de poner en práctica mis conocimientos adquiridos a lo largo de la carrera; los que me permitieron verificar el cumplimiento de las normativas exigidas por el departamento de bromatología de los CU, tomando como base en las exigencias establecidas en el Código Alimentario Argentino (CAA); realizar la corrección de no conformidades; y evaluar la aplicación de los Procedimientos Operativos Estandarizados para el Saneamiento (POES) implementados por parte del personal perteneciente a los comedores, que gratamente demostraron su interés y preocupación por la inocuidad de los alimentos.Ítem Embargo Evaluación de la obtención de emulsiones agua/agua (W/W) estabilizadas por gelación a partir de mezclas de micelas de caseína y goma tara para la encapsulación de compuestos bioactivos(2023-04-13) Gispert, Gustavo; Hidalgo, María EugeniaEn los últimos años, se ha prestado más atención al desarrollo de dietas más saludables y, por lo tanto, existe una demanda de productos alimenticios con propiedades bioactivas. El desarrollo de nuevos alimentos adicionados con compuestos con propiedades bioactivas, especialmente antioxidantes, enfrenta una problemática: su inestabilidad frente a diversas condiciones de procesamiento y almacenamiento. La encapsulación en matrices biopoliméricas es una tecnología que permite su protección del medio externo, facilita su vehiculización y mejora su bioaccesibilidad y biodisponibilidad. En este trabajo de tesina se evaluaron mezclas de micelas de caseína (MC) y goma tara (GT), ambos biopolímeros alimentarios que, por combinación con procesos de separación de fases y gelificación ácida, permitieron obtener microgeles o emulsiones agua/agua (W/W) estables con capacidad para encapsular compuestos bioactivos naturales, en particular antocianinas (AC) de arándanos. Durante el trabajo de tesina se aplicaron técnicas espectroscópicas, de dispersión dinámica de la luz, microscopía, estudios reológicos y de bioactividades, entre otras. Se observó que es posible obtener microgeles estables por competencia entre el proceso de separación de fases y gelación ácida proteica de mezclas entre MC y GT en determinados rangos de concentraciones. Estas micropartículas permitirían encapsular y/o mejorar la estabilidad de las AC de arándanos y/o cualquier otro compuesto bioactivo de origen natural. De esta manera, sería posible obtener encapsulados estables que podrían ser incorporados en forma de geles y/o polvo a diversos productos alimenticios otorgando valor agregado a los mismos.Ítem Embargo Caracterización de la proteína TcHRG salvaje y las mutantes Y16G y Y127G de Trypanosoma cruzi en Saccharomyces cerevisiae(2025-05-21) Santone, Agustina Belén; Cricco, Julia AlejandraEl metabolismo del hemo es un proceso esencial en diversos organismos, incluidos parásitos como Trypanosoma cruzi, el agente etiológico de la enfermedad de Chagas. A diferencia de otros eucariotas, T. cruzi es incapaz de sintetizar hemo de novo y debe obtenerlo del hospedador. En este contexto, el grupo de investigación identificó la proteína TcHRG, cuyo rol en la captación y utilización del hemo constituye el eje central del presente estudio. Se planteó evaluar dos mutantes puntuales de TcHRG (Y16G y Y127G) en el sistema heterólogo Saccharomyces cerevisiae Δhem1, una cepa deficiente en la síntesis de ácido aminolevulínico (δ-ALA), precursor en la biosíntesis del hemo. Para ello, se diseñó una estrategia de clonado en plásmidos para la expresión de las tres versiones de la proteína (WT, Y16G, Y127G) en S. cerevisiae y se analizó el crecimiento de las células en condiciones de baja disponibilidad de hemo. Sin embargo, solo se logró evaluar TcHRG.Y16G, ya que no fue posible clonar el gen correspondiente a TcHRG.Y127G. Los resultados obtenidos indican que la mutación puntual Y16G no afecta la actividad de la proteína, y mediante análisis bioinformático se observó que la estructura global de la proteína salvaje se mantiene estable en las versiones mutantes. Por último, se clonaron ambas variantes mutantes en un plásmido de expresión para T. cruzi. Estas construcciones, obtenidas con éxito, sientan las bases para futuros estudios en el parásito.Ítem Embargo Desarrollo de metodologías sintéticas innovadoras: amplificación de la diversidad molecular y purificación simultánea(2024-12-12) Fernández, Florencia; Delpiccolo, Carina M. L.Este Trabajo Final de Carrera consistió en realizar avances en el desarrollo de una metodología para separar mezclas de compuestos químicamente muy similares, aumentando simultáneamente la diversidad estructural de la mezcla. Para evaluar el alcance de dicha estrategia en la purificación y amplificación estructural de diferentes mezclas, se llevaron a cabo reacciones de Diels-Alder (D-A) usando el dienófilo soportado derivado de la β-alanina 4 sobre dos mezclas de carbocíclos en solución (Esquema 1). Las mezclas a separar provienen de reacciones de metátesis de eninos con cierre de anillo en condiciones reductivas. En el Esquema 1 se muestra la reacción del dienófilo soportado 4 con la mezcla de los carbociclos 2 y 3, obtenidos a partir del enino 1. Una vez transcurrida esta reacción de D-A, se genera el aducto 5, que al estar unido al soporte polimérico es filtrado, obteniendo de esta manera el ciclopentano 2 como único producto en la solución. Finalmente, el producto de cicloadición 5 fue separado de la resina por tratamiento acídico, dando la amida del aducto de Diels-Alder 6, que fue posteriormente purificado mediante una cromatografía preparativa en capa delgada. El aducto de D-A 6 fue caracterizado mediante Resonancia Magnética Nuclear (RMN) y espectrometría de masas de alta resolución (HRMS, del inglés: High Resolution Mass Spectrometry).Ítem Embargo Control de calidad en la elaboración de queso mozzarella(2025-03-07) Turdo, Martina; Giordanengo, Virginia; Rodríguez, CintiaEl control de calidad es un aspecto fundamental en la industria alimentaria, ya que garantiza el cumplimiento de la legislación vigente, contribuye a la inocuidad alimentaria e impacta directamente en la calidad y eficiencia de los procesos productivos. Este trabajo tuvo como objetivo realizar los controles de calidad durante la elaboración de queso mozzarella en la empresa Pergalac SRL. Se realizaron análisis fisicoquímicos y microbiológicos en diferentes etapas del proceso productivo, incluyendo la recepción de materias primas, etapas intermedias y en el producto final. Los resultados obtenidos demostraron que las materias primas utilizadas en el proceso (leche cruda y masa para elaborar queso mozzarella preelaborada) cumplieron con los requisitos establecidos por el Código Alimentario Argentino (CAA) y, en la mayoría de los casos, con los requisitos establecidos por la empresa. En el caso de las masas para elaborar queso mozzarella adquiridas externamente, se observaron algunos parámetros por fuera de las especificaciones establecidas por la empresa, sin embargo, estas se utilizaron igualmente ya que modificando levemente el proceso de producción se logra obtener un producto con la calidad deseada. Durante las etapas intermedias del proceso, se monitorearon parámetros claves como pH, acidez y humedad, verificando así el cumplimiento de los requisitos establecidos por el CAA y por la empresa. Finalmente, los controles del producto terminado confirmaron que el queso mozzarella obtenido presentó valores dentro de los límites aceptables y cumplió con los requisitos fisicoquímicos y microbiológicos exigidos, verificando su aptitud para su comercialización. Este trabajo evidenció la importancia de un control de calidad efectivo en la industria quesera. Además, se trató de una experiencia que permitió aplicar los conocimientos adquiridos durante la Licenciatura en Ciencia y Tecnología de los Alimentos en un entorno laboral y reafirmar el valor de las prácticas profesionales como una instancia clave para la integración de teoría y práctica en el ámbito de la industria alimentaria.Ítem Embargo Enzimas para el procesamiento de ácido hialurónico(2025-03-21) Rodríguez, Martina; Cerminati, Sebastián; Haidar, Carla NahirEl ácido hialurónico (AH) es un glucosaminoglicano lineal ampliamente distribuido en el cuerpo humano, principalmente en la matriz extracelular de las células. Debido a sus propiedades únicas, como su capacidad para retener agua y su biocompatibilidad, el AH tiene un mercado importante y diverso, que abarca industrias farmacéuticas, alimenticias, médicas y cosméticas. Sin embargo, las aplicaciones del AH en estas áreas dependen en gran medida de su peso molecular, lo que ha llevado a la demanda de AH de distintos tamaños. Existen varias estrategias biotecnológicas para obtener AH de diferentes pesos moleculares. Una de ellas es la ingeniería genética y otra consiste en utilizar hialuronidasas, enzimas capaces de escindir el AH en fragmentos más pequeños. Estas enzimas, presentes en vertebrados y bacterias, degradan el AH, lo que permite ajustar su peso molecular según las necesidades específicas de cada aplicación. En este trabajo de tesina, se abordó la segunda estrategia mencionada. Para ello, se seleccionaron genes homólogos a enzimas hialuronidasas presentes en animales y bacterias, con el objetivo de expresarlos en distintos microorganismos. Uno de estos genes se logró expresar con éxito en Escherichia coli, y posteriormente se caracterizó su actividad enzimática. Este enfoque representa un avance en la producción controlada de AH de diferentes pesos moleculares, lo que podría tener implicaciones significativas en las industrias que dependen de este versátil biopolímero.Ítem Embargo Construcción de bacterias ácido lácticas recombinantes con actividad celulasa(2025-04-30) Terzariol, Marina; Blancato, Víctor Sebastián; Gizzi, Fernán O.: Director AsistenteEl norte Santafesino y otras regiones del país utilizan para la alimentación ganadera diferentes especies forrajeras o, alternativamente, fardos de rastrojo de sorgo y trigo, entre otros sustratos de baja calidad. Debido al crecimiento de la población mundial y al consecuente incremento del consumo de alimentos, se espera que la demanda de carne y leche se duplique en los próximos 40 años, aumentando inevitablemente el número de rumiantes en el planeta imponiéndose así un desafío a los recursos globales y a la seguridad alimentaria. En este sentido, resulta de gran interés mejorar la capacidad de aprovechamiento de pasturas de baja calidad como alimento para el ganado. En este trabajo de tesina se busca contribuir al mejoramiento de la calidad de los ensilados para ganado vacuno, evaluando nuevas estrategias biotecnológicas. En particular, se investiga la generación de una cepa de bacteria ácido láctica capaz de producir celulasas para ser utilizada en el ensilado. Se centra en la expresión y secreción de la enzima β-glucosidasa, responsable del último paso en la degradación de la celulosa. Para ello, se empleó la cepa Lactococcus lactis NZ9000 como huésped y se diseñaron dos construcciones con diferentes plásmidos para comparar su capacidad de expresión. Los vectores evaluados fueron pNZ170-usp, que emplea un sistema de expresión inducible por pH ácido y ácido láctico, compuesto naturalmente presente en la fermentación del ensilado, y pFG001, que utiliza el sistema inducible por nisina (NICE), ampliamente caracterizado y utilizado en biotecnología. Con este último plásmido, se logró la expresión de β-glucosidasa en L. lactis. Además, se evaluó la actividad enzimática a diferentes temperaturas, determinándose que la proteína es funcional y presenta mayor actividad a temperaturas elevadas.Ítem Embargo Análisis de los mecanismos moleculares de la oxidación de Mn(II) en pseudomonas resinovorans para potenciar la biorremediación de metales(2024-12-04) Gaffuri, Marilina; Gottig, Natalia; Parra, Lucía: Directora AsistenteLa presencia de manganeso (Mn) en aguas subterráneas representa un problema significativo para la calidad del agua potable en Argentina, debido a los efectos nocivos en la salud y el impacto en los sistemas de distribución. Este estudio se centra en la capacidad de Pseudomonas resinovorans MOB-513 para oxidar Mn (II), proceso que ocurre únicamente en condiciones de biofilm y es regulado por el segundo mensajero c-di-GMP. Se analizan los mecanismos moleculares involucrados en la formación de biofilms y en la oxidación de Mn (II), evaluando el rol de las proteínas histidina quinasa HK2948 (HK) y regulador de respuesta RR2947 (RR), así como de componentes clave del Pili Tipo IV (Tfp). Mediante ensayos de motilidad por twitching, formación de biofilms y oxidación de Mn(II) en mutantes de MOB-513, se estableció que HK y RR son esenciales para la señalización mediada por c-di-GMP que regula la transición a un modo de vida sésil. En las mutantes ΔpilC y ΔpilH, solo ΔpilH recuperó la oxidación de Mn(II) mediante la sobreexpresión de c-di-GMP, sugiriendo que tanto PilC como este mensajero son esenciales para este proceso. Además, se evaluó el operón mop7013-7014, responsable de la síntesis de proteínas hemo-peroxidasas involucradas en la oxidación de Mn (II). Los resultados indican que, aunque la cepa MOB-513-pdgc muestra un incremento en la expresión del operón, este aumento no es evidente en las cepas mutantes con niveles elevados de c-di-GMP, sugiriendo que estas cepas pueden emplear un mecanismo alternativo de oxidación. El análisis proteómico diferencial entre la cepa MOB-513 (WT) y la mutante Δhk reveló que en ausencia de HK, la cepa mutante experimenta una represión generalizada en sus rutas metabólicas, incluyendo una disminución en la biogénesis de citocromos y alteraciones en proteínas estructurales y de motilidad, como las del pili tipo IV y el flagelo. Estos cambios limitan su capacidad para formar biofilms y realizar la oxidación de Mn(II), lo que destaca el papel crucial de HK en la adaptación de P. resinovorans MOB-513 a condiciones de baja disponibilidad de nutrientes. En conclusión, los resultados de este estudio destacan la interacción crucial entre el c-di-GMP, las proteínas HK y RR, y los componentes del Tfp en la regulación de la formación de biofilms y la oxidación de Mn (II) en Pseudomonas resinovorans. HK y RR emergen como reguladores esenciales que, en conjunto con el Tfp, facilitan la adaptación metabólica de la bacteria en condiciones de baja disponibilidad de nutrientes mediante el aumento de c-di-GMP. Estos hallazgos proporcionan una base sólida para futuras investigaciones enfocadas en aprovechar estos mecanismos en aplicaciones de biorremediación.Ítem Embargo Fortaleciendo la base racional para el desarrollo de alternativas terapéuticas en tuberculosis: interacciones entre rifampicina y dehidroepiandrosterona(2025-04-24) Vich, Eugenia Micaela; Díaz, Ariana; D'Attilio, Luciano: Director SupervisorLa tuberculosis (TB), causada por Mycobacterium tuberculosis (Mtb), es una de las principales causas de muerte por un agente infeccioso, superando al HIV/SIDA. Su tratamiento convencional con Isoniazida, Rifampicina (R), Pirazinamida y Etambutol es prolongado y su abandono favorece la resistencia bacteriana. La Organización Mundial de la Salud (OMS) destaca la necesidad de desarrollar nuevas estrategias terapéuticas que reduzcan la duración del tratamiento. Además del sistema inmunológico, el sistema Neuroendocrino participa en la fisiopatogenia de la TB. Se ha observado que el descenso en los niveles de Dehidroepiandrosterona (DHEA) sérica, asociados a la severidad de la TB y al deterioro de la RI anti-TB. Sin embargo, durante el tratamiento antibacilar, la recuperación clínica cursa con el restablecimiento de los niveles de DHEA. Esta hormona tiene propiedades inmunomoduladoras y antiinflamatorias, con aplicaciones en enfermedades autoinmunes y respiratorias. Por ello, su incorporación como coadyuvante en el tratamiento de la TB podría contribuir a optimizar la RI específica, y por ende defensiva, favoreciendo la destrucción bacteriana y contribuyendo a la disminución en el tiempo del tratamiento anti-TB. Este trabajo evaluó el efecto inmunomodulador de la Rifampicina, un antibiótico clave en el tratamiento de la TB, sobre macrófagos derivados de monocitos humanos (MDMh) estimulados con M. tuberculosis irradiado (Mtbi). Se observó que la estimulación inducía un aumento significativo de las citocinas proinflamatorias IL-1β e IL-6. No obstante, el tratamiento con R redujo estos niveles, potenciándose aún más en presencia de cortisol y DHEA. Asimismo, se analizó el impacto de R en la esteroidogénesis adrenal mediante el uso de células NCI-H295R activadas con Forskolin (FSK) y tratadas con diferentes dosis de R. Se observó que R disminuyó la producción de DHEA de manera dosis-dependiente, sin alterar los niveles de Dehidroepiandrosterona sulfato (DHEA-S) ni cortisol. Además, se registró un aumento en la expresión de la enzima CYP17A1 en células tratadas con R y altas dosis de FSK, mientras que la expresión de SULT2A1 disminuyó en todos los cultivos activados y tratados con R. Estos hallazgos sugieren que la Rifampicina modularía la respuesta inflamatoria y la producción de DHEA, lo que podría tener implicaciones en su uso terapéutico y en la optimización del tratamiento de la TB.Ítem Embargo Producción de bioplásticos(2024-12-19) Adaglio, Selene Paz; Boggione, María Julia; Ingrassia, RominaLa creciente demanda mundial de materiales plásticos ha provocado una grave contaminación por residuos plásticos, en particular al medio acuático. Este problema crítico afecta tanto a la vida marina como a los seres humanos, ya que los microplásticos pueden entran en la cadena alimentaria y causan varios impactos en la salud. Reciclaje de plástico, tratamientos químicos, incineración y los vertederos aparentemente no son las soluciones óptimas para reducir la contaminación plástica. La producción de bioplásticos, un material bio-basado, biodegradable y biocompostable se presenta como alternativa para reemplazar los plásticos a base de petróleo. El objetivo general del proyecto es producir bioplásticos con características biodegradables y biocompostables. Pueden fabricarse a partir de polímeros como almidón, proteínas y algas o microalgas.Ítem Embargo Estudio del efecto de la tirosinación de tubulina en la estructura y dinámica del citoesqueleto en el protozoo flagelado Trypanosoma cruzi(2025-03-20) Baldasseroni, Lucila; Alonso, Victoria Lucía; Martínez Peralta, GonzáloEste trabajo de tesina se centró en el estudio de la tirosinación de α-tubulina en la estructura y dinámica del citoesqueleto del protozoo flagelado Trypanosoma cruzi, agente etiológico de la enfermedad de Chagas. Esta modificación postraduccional de la tubulina es clave en la regulación del citoesqueleto, pero su función en tripanosomátidos sigue siendo poco comprendida. Para ello se identificaron dos secuencias homólogas a tubulin tirosin ligasas (TTL) en el genoma de T.cruzi y se realizó un análisis bioinformático de estas. Se diseñó una estrategia de edición génica con el sistema CRISPR/Cas9 para generar mutantes delecionales de los genes identificados, utilizando vectores específicos. Adicionalmente, se llevó a cabo la transfección de epimastigotes con la construcción TcBilbo1::eGFP para evaluar la colocalización de Bilbo1, una proteína del bolsillo flagelar, en estructuras del citoesqueleto del parásito. La localización de la α-tubulina tirosinada en los diferentes estadios del parásito se estudió mediante microscopía confocal e inmunofluorescencia. Además, se realizaron ensayos de extracción y análisis de proteínas del citoesqueleto mediante electroforesis en geles de poliacrilamida (SDS-PAGE) y Western blot. Para complementar el estudio, se implementó la técnica de microscopía de expansión con el fin de mejorar la resolución de las estructuras analizadas.Ítem Embargo Desarrollo de métodos one-pot a partir de N-tosiltriazoles hacia la generación de compuestos de interés con diversidad y complejidad estructura(2024-12-18) Bianchini, Maira Ángeles; Delpiccolo, Carina M. L.; Permingeat Squizatto, Caterina: Directora AsistenteEl arreglo estructural de pirrolidinas se encuentra presente en un incontable número de productos naturales y sintéticos con actividad biológica. Basado en avances previos del grupo de trabajo, que establecieron un protocolo simple y eficiente para la modulación de Nsulfoniltriazoles, hacia la obtención de diferentes heterociclos bajo catálisis de [Rh(II)], este trabajo aborda la optimización de una estrategia one-pot hacia la síntesis de Nsulfonilpirrolidinas 5, integrando la transanulación de N-sulfoniltriazoles 1 con alquenos 2 bajo catálisis de [Rh(II)], seguido de un reordenamiento Cloke-Wilson y reducción mediante un sistema triisopropilsilano/I2. Se evaluaron diferentes condiciones y sistemas reductores logrando una metodología óptima hacia la conversión eficiente de pirrolidinas 5. Además, se exploró el alcance de la reacción mediante un análisis de los sustratos compatibles, identificando los grupos funcionales y sustratos más eficientes para el desarrollo metodológico. Esta estrategia one-pot demostró ser práctica y eficiente, ya que elimina la necesidad de purificar y aislar intermediarios, reduciendo significativamente el tiempo y los recursos requeridos en el proceso. Estos hallazgos destacan la utilidad de esta metodología para la síntesis eficiente de pirrolidinas, contribuyendo a ampliar las metodologías sintéticas ambientalmente responsable.Ítem Embargo Diseño y caracterización de panes en base a harina de arroz adicionados con harina de arveja amarilla fermentada(2024-12-05) Tedaldi, Camila; López, Débora Natalia; Forastieri, Pamela S.El pan de trigo es uno de los alimentos más consumidos en el mundo moderno, sin embargo, la ingesta de gluten causa una reacción alérgica en las personas celíacas. El único tratamiento eficaz en estos pacientes consiste en una dieta con productos libres de gluten, aunque su calidad nutricional y aceptabilidad sensorial suele ser baja, ya que se formulan generalmente a partir de harina de arroz y almidones. Una alternativa para mejorar estos productos es reemplazar parcialmente la harina de arroz por harina de legumbres, sometidas previamente a fermentación para disminuir el contenido de antinutrientes. En el presente trabajo se formularon 3 tipo de panificados con harina de arveja amarilla (HAA): HAA(K30), elaborado con HAA fermentada con kéfir durante 30 h y dos panes control: HAA(K), formulado con kéfir y HAA sin fermentar, y HAA(L), reemplazando la misma proporción de kéfir por leche en polvo reconstituida. Las condiciones de fermentación fueron optimizadas en estudios previos en el laboratorio. Se evaluaron las características fisicoquímicas, las propiedades de textura y los atributos sensoriales de los panificados. La fermentación de la HAA permitió la obtención de un producto con propiedades tecnológicas y sensoriales adecuadas.Ítem Embargo Factores de transcripción que controlan el crecimiento y desarrollo en las plantas(2024-12-16) López Alsina, María Mercedes; Rodríguez, Ramiro Esteban; Barrera, Virginia Lis: Directora AsistenteEl continuo aumento de la población mundial y la degradación de suelos nos presenta el desafío de aumentar la producción de productos derivados de la agricultura. El estudio de las redes regulatorias de la expresión génica en plantas nos permite comprender parte de su crecimiento y desarrollo, a partir de los cuales podemos generar herramientas que incrementen el rinde de los cultivos. En el presente trabajo de Tesina de Grado continuamos con la caracterización del factor de transcripción (FT) SCL28 que presenta varios roles en el desarrollo de plantas. Primeramente, SCL28 promueve la proliferación celular, modula la selección de planos de división y la progresión del ciclo celular mitótico en células que se encuentran en activa división en los meristemas. Así mismo, este FT está involucrado en promover la transición del ciclo celular mitótico a la endorreplicación mediante la activación de inhibidores de ciclinas mitóticas. En adición, por fuera de la zona meristemática, SCL28 promueve la expansión celular ya que regula genes relacionados a la biogénesis y remodelación de las paredes celulares. Por ello, decidimos iniciar el diseño y construcción de vectores binarios para sobreexpresar y obtener reporteros transcripcionales y traduccionales de genes regulados por SCL28 para luego introducirlos en Arabidopsis thaliana y poder evaluar y analizar su efecto en plantas silvestres y mutantes scl28-3. Por otro lado, nos propusimos obtener una línea homocigota para plantas de Arabidopsis mutantes en SCL28 que expresen un reportero de las fases del ciclo celular. Este reportero nos permite evidenciar en qué fase se encuentran las distintas células de un órgano, mediante la expresión de distintas proteínas fluorescentes dependiendo de la fase del ciclo en la que éstas se encuentren. Una vez obtenida la línea transgénica mutante homocigota procedimos a analizar el patrón de distribución de fases del ciclo celular en raíces de plantas silvestres y mutantes en SCL28. De esta manera, comparamos y evaluamos posibles cambios en la distribución de los ciclos celulares mitótico y endorreplicativo. Los genes de la familia SIAMESE-RELATED (SMR) son inhibidores de quinasas dependientes de ciclinas (CDK). La expresión de algunos de estos genes se encuentra regulada por SCL28. Es por esto, que realizamos un análisis para evaluar el efecto de la sobreexpresión de estos genes SMR en raíces de plantas de A. thaliana silvestre y mutante. Este análisis mostró una complementación parcial del fenotipo mutante en SCL28 mediante la sobreexpresión del gen SMR13, lo cual apoya la hipótesis de la regulación de este gen por SCL28.Ítem Embargo Caracterización de sistemas de resistencia a mercurio de un plásmido de multi-resistencia de Salmonella Typhimuriums(2024) Trumper, Martín; Checa, Susana KarinaEl mercurio (Hg) es un metal tóxico que afecta gravemente la salud humana y la diversidad de la biota. Las bacterias han desarrollado mecanismos para detectar y resistir este contaminante, ya sea en su forma ionizada (Hg²⁺) o cuando está unido covalentemente a compuestos orgánicos (organomercuriales). La desintoxicación requiere la entrada de estas especies tóxicas al citoplasma a través de transportadores y, si es necesario, la liberación de Hg²⁺ mediante la acción de una liasa de organomercuriales. Luego, el Hg²⁺ es reducido a Hg⁰, que es menos dañino, se volatiliza y permite su eliminación. Los determinantes de resistencia generalmente están codificados en un único operón asociado con la proteína sensora/reguladora MerR, que detecta el ion en el citoplasma y activa su transcripción. Estos loci suelen estar codificados en plásmidos que contienen, además, múltiples determinantes de resistencia a otros metales (o metaloides) y antibióticos, así como elementos genéticos móviles. Dado el problema de la diseminación y la co-selección de resistencia a los antimicrobianos, se planteó la caracterización de uno de estos plásmidos presente en diferentes aislados clínicos de Salmonella Typhimurium. Este plásmido contiene no uno, sino dos loci de resistencia a Hg, mer1 y mer2, y las cepas que los portan son al menos 16 veces más resistentes a Hg²⁺ que la cepa silvestre. Para evaluar la contribución de cada locus a la tolerancia al Hg, mer1 y mer2 fueron clonados en plásmidos compatibles e introducidos en cepas de Escherichia coli y en Salmonella Typhimurium. La presencia de mer1 o mer2 aumentó la resistencia al HgCl₂, aunque mer1 fue el principal contribuyente. Solo mer2, que codifica la liasa organomercurial MerB, proporcionó resistencia a la forma orgánica de este contaminante. Llamativamente, en las condiciones ensayadas no se logró evidenciar un efecto aditivo de estos loci sobre la tolerancia a compuestos del mercurio, observando en todos los casos niveles de resistencia similares a los de la cepa que porta el loci dominante y niveles de resistencia significativamente menores a los observados para el aislamiento clínico 33676. A la luz de estos resultados, se investigó la posibilidad de co-regulación entre estos loci. Para ello, se clonó en diferentes plásmidos las proteínas reguladoras MerR, MerR1 y MerR2, y la región promotora de cada operón (PmerT1 y PmerT2) aguas arriba del gen reportero lacZ. Usando ensayos de actividad β-galactosidasa, se analizó la capacidad de cada proteína reguladora para modular la expresión de su operón asociado y del operón asociado al otro regulador. Los resultados obtenidos indican que tanto MerR1 como MerR2 controlan eficientemente la transcripción de ambos operones en respuesta a Hg2+, aunque se observó una mayor capacidad de activación para su operón asociado. En ausencia del inductor, ambos factores regulatorios fueron igualmente eficientes para reprimir la transcripción de estos promotores. Se observaron también diferencias en la expresión basal de los promotores ensayados. Estos hallazgos contribuyen a la caracterización de determinantes de resistencia a mercurio de amplio espectro presentes en plásmidos de multi-resistencia de bacterias patógenas. Por esto, tienen implicancia para la salud y la biotecnología, ya que estos loci de resistencia podrían servir de base para el desarrollo futuro de herramientas para el cuidado ambiental.Ítem Embargo Caracterización in silico y análisis funcional de nuevos factores implicados en la protección frente al daño por frío en frutos(2024) Aimaro, Nicolás; Bustamante, Claudia Anabel; Gismondi, MauroLa refrigeración es una de las herramientas más utilizadas para prolongar la vida poscosecha de los tomates. Las bajas temperaturas permiten retrasar el proceso de maduración y mantener la calidad del fruto durante el almacenamiento, transporte y comercialización. Sin embargo, bajo estas condiciones el tomate se ve afectado por desórdenes fisiológicos denominados genéricamente “daño por frío”, los que se evidencian en el momento del consumo y que difícilmente pueden ser percibidos en las etapas previas de la cadena de comercialización. En la presente tesina se elaboró un catálogo de genes de Solanum lycopersicum, utilizando Arabidopsis thaliana como modelo para identificar genes ortólogos relacionados con la respuesta al frío. Adicionalmente, se llevaron a cabo análisis de expresión de los genes HD2C (histona desacetilasa 2c) obteniéndose una correlación entre los estudios in silico y la respuesta al estimulo por bajas temperaturas en la especie de interés. Los resultados obtenidos sugieren que una amplia diversidad de procesos celulares forman parte de la respuesta de los frutos frente al frío. Evaluar si HD2C brinda una protección frente al daño por frio será esencial para lograr obtener variedades con mayor calidad poscosecha.Ítem Embargo Bacteriófagos como agentes de biocontrol de patógenos en acuicultura(2025) García, Milagros; Suárez, Cristian Alejandro; Guaragna, GabrielaEste trabajo se enfocó en la búsqueda y caracterización de bacteriófagos líticos activos contra Aeromonas hydrophila, un patógeno relevante en acuicultura por su capacidad de causar enfermedades que generan pérdidas económicas significativas en el sector. Ante la creciente resistencia de este patógeno a los antibióticos convencionales, se plantea la terapia fágica como una alternativa sostenible. El enfoque general del estudio consistió en el aislamiento, amplificación y caracterización de fagos líticos activos contra A. hydrophila a partir de diferentes muestras de agua tales como, arroyos, ríos y criaderos de peces, etc. Se aislaron cuatro fagos (MA-58 H10, MA-58 H2, MA-49 H10 y MA-49 H2) y se seleccionaron dos (MA-58 H2 y MA-49 H10) por su destacada actividad lítica y características particulares. El fago MA-58 H2 mostró un rango de hospedador más amplio y más rápida capacidad de lisis, mientras que MA-49 H10 presentó actividad sostenida en el tiempo. La caracterización fenotípica demostró que ambos fagos son estables a 30°C y en pH cercanos a la neutralidad, condiciones compatibles con ambientes acuícolas. Además, no requieren calcio para su adsorción, lo que facilita su implementación en diversos entornos. Los análisis genómicos confirmaron la ausencia de genes de virulencia, resistencia a antibióticos y de integración, asegurando su viabilidad terapéutica. MA-58 H2 presentó potencial significativo en el control de biofilms gracias a la actividad de enzimas depolimerasas identificadas, mientras que MA-49 H10, un Jumbo fago, destacó por codificar una amplia cantidad de genes, lo que le confiere mayor independencia en su ciclo replicativo. En conclusión, logramos aislar y caracterizar fagos con potencial aplicación biotecnológica para el biocontrol de A. hydrophila en acuicultura y estrategias futuras para combatir la resistencia bacteriana.