Construcción de bacterias ácido lácticas recombinantes con actividad celulasa

El norte Santafesino y otras regiones del país utilizan para la alimentación ganadera diferentes especies forrajeras o, alternativamente, fardos de rastrojo de sorgo y trigo, entre otros sustratos de baja calidad. Debido al crecimiento de la población mundial y al consecuente incremento del consumo de alimentos, se espera que la demanda de carne y leche se duplique en los próximos 40 años, aumentando inevitablemente el número de rumiantes en el planeta imponiéndose así un desafío a los recursos globales y a la seguridad alimentaria. En este sentido, resulta de gran interés mejorar la capacidad de aprovechamiento de pasturas de baja calidad como alimento para el ganado. En este trabajo de tesina se busca contribuir al mejoramiento de la calidad de los ensilados para ganado vacuno, evaluando nuevas estrategias biotecnológicas. En particular, se investiga la generación de una cepa de bacteria ácido láctica capaz de producir celulasas para ser utilizada en el ensilado. Se centra en la expresión y secreción de la enzima β-glucosidasa, responsable del último paso en la degradación de la celulosa. Para ello, se empleó la cepa Lactococcus lactis NZ9000 como huésped y se diseñaron dos construcciones con diferentes plásmidos para comparar su capacidad de expresión. Los vectores evaluados fueron pNZ170-usp, que emplea un sistema de expresión inducible por pH ácido y ácido láctico, compuesto naturalmente presente en la fermentación del ensilado, y pFG001, que utiliza el sistema inducible por nisina (NICE), ampliamente caracterizado y utilizado en biotecnología. Con este último plásmido, se logró la expresión de β-glucosidasa en L. lactis. Además, se evaluó la actividad enzimática a diferentes temperaturas, determinándose que la proteína es funcional y presenta mayor actividad a temperaturas elevadas.