Mecanismos intracelulares involucrados en la colestasis por estrógenos : rol del receptor de estrógenos
| dc.contributor.advisor | Sánchez Pozzi, Enrique Juan | |
| dc.contributor.coadvisor | Crocenzi, Fernando A. | |
| dc.creator | Barosso, Ismael R. | |
| dc.date.accessioned | 2019-08-09T17:21:35Z | |
| dc.date.available | 2019-08-09T17:21:35Z | |
| dc.date.issued | 2013-03-18 | |
| dc.description.abstract | El estradiol 17ß-D-glucurónido (E17G) induce colestasis aguda en la rata con internalización endocítica de los transportadores canaliculares, Abcb11 y Abcc2. Las vías de señalización de la proteína quinasa clásica (PKCc) y las vías de señalización de PI3K juegan roles complementarios en la colestasis por E17G, también se ha reportado la participación de la vía GPR30/AC/PKA. Ya que el estradiol no conjugado es capaz de activar estas vías de señalización a través de la activación del receptor de estrógeno alfa (REα), en este trabajo de Tesis se postula como hipótesis la participación de REα en las manifestaciones colestásicas del E17G en el modelo de Hígado Aislado y Perfundido de rata (HAPR) como así también en modelos de cultivos primario de hepatocitos de rata. En el modelo de HAPR y en cultivo primario de hepatocitos, el E17G activó el REα. En HAPR, E17G disminuyó el flujo biliar y las excreciones de dinitrofenilglutation, y taurocolato (sustratos específicos de Abcc2 y Abcb11, respectivamente) en aproximadamente 60 %; la pre-administración de ICI (inhibidor de REα) previno en forma casi completa estas disminuciones. En el modelo de duplas aisladas de hepatocitos de rata (DAHR), un modelo polarizado de hepatocitos en cultivo, el tratamiento con E17G disminuyó la acumulación vacuolar canalicular de colil-glicilamido fluoresceína (sustrato de Abcb11) con un CI50 de 91±1 μM. El tratamiento con ICI aumentó la CI50 a 102±1 μM, y similarmente previno la disminución de la acumulación vacuolar canalicular del sustrato de Abcc2, glutatión-metil fluoresceína, con una CI50 de 104±1μM sin ICI y un CI50 de 164±2 μM en presencia del inhibidor. El inhibidor ICI también previno completamente la internalización endocítica de los transportadores canaliculares Abcb11 y Abcc2. La participación de REα se confirmó a través del uso de knock-down del REα en cultivo primario de hepatocitos en configuración “sándwich” (HRCS) donde se observó que la disminución de la expresión de REα previno la internalización de ambos transportadores cuando las células fueron tratadas con E17G. En el modelo de DAHR, la protección de ICI tuvo un efecto sumatorio cuando fue probado conjuntamente con Wortmanina, un inhibidor de PI3K pero no se observó un efecto sumatorio con el inhibidor Gö6976, un inhibidor de PKCc; sugiriendo que REα forma parte de la vía de señalización de PKCc pero no de la vía de señalización de PI3K. Un análisis más detallado de las activaciones REα y PKCc inducida por E17G, demostró que ICI no afecta a la activación PKCc mientras que Gö6976 impidió la activación de REα, lo que indica que la activación de PKCc (evaluada a través de la activación de PKCα) precede a la activación de REα. Por otro lado, también se observó mediante la técnica de western blot en cultivo primario de hepatocitos que la activación de REα ocurriría independientemente de la vía GPR30/AC/PKA y que probablemente la fosforilación de sustratos de PKA (o su mantenimiento en estado fosforilado) depende de la activación de REα. Conclusión: el REα está implicado en la falla secretora biliar inducida por E17G y su activación ocurre luego de la activación de PKCc. REα activado participaría en cascadas de señalización que conducen a la desinserción como por ejemplo las derivadas de la activación de PKA. | es |
| dc.description.fil | Fil: Barosso, Ismael R. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Fisiología Experimental (IFISE-CONICET); Argentina. | es |
| dc.format | application/pdf | |
| dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/2133/15728 | |
| dc.language.iso | spa | es |
| dc.publisher | Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. | es |
| dc.rights | es | |
| dc.rights.holder | Barosso, Ismael R. | es |
| dc.rights.text | Atribución – No Comercial – Compartir Igual (by-nc-sa): No se permite un uso comercial de la obra original ni de las posibles obras derivadas, la distribución de las cuales se debe hacer con una licencia igual a la que regula la obra original. https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/ | es |
| dc.rights.uri | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/ | * |
| dc.subject | Colestasis | es |
| dc.subject | BSEP | es |
| dc.subject | MRP2 | es |
| dc.subject | Receptor de Estrógeno | es |
| dc.title | Mecanismos intracelulares involucrados en la colestasis por estrógenos : rol del receptor de estrógenos | es |
| dc.type | doctoralThesis | |
| dc.type | Tésis de Doctorado | |
| dc.type | acceptedVersion | |
| dc.type.collection | tesis | |
| dc.type.other | doctoralThesis | es |
| dc.type.version | acceptedVersion | es |
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