Evaluación de una proteína de Trypanosoma cruzi como posible marcador diagnóstico

La proteína High Mobiliy Group B de Trypanosoma cruzi (TcHMGB), al igual que otros miembros de la familia HMGB, participa en importantes procesos nucleares por su capacidad de alterar la estructura de la cromatina. Más allá de sus funciones nucleares, en mamíferos, la proteína HMGB1 (mHMGB1) puede ser secretada al medio extracelular bajo condiciones de estrés celular y actuar como “patrón molecular asociado a daño” (DAMP) mediando procesos inflamatorios. Mediante ensayos in vitro e in vivo, observamos que TcHMGB es capaz de inducir una respuesta inflamatoria y es detectada en cortes de tejido de un modelo de infección murino con la cepa Tulahuén de T. cruzi, tanto en células infectadas como en la región extracelular, lo que sugiere que TcHMGB sería secretada durante la infección. A partir de estos antecedentes, decidimos evaluar su potencialidad como marcador de la infección y su posible aplicación para el diagnóstico de la enfermedad de Chagas. En primer lugar, se realizó un análisis bioinformático de distintos aspectos del gen y de la secuencia proteíca de TcHMGB utilizando la base de datos TritrypDB y diferentes programas. Se recopiló así, información valiosa acerca de su localización genómica, los niveles de expresión durante el ciclo de vida del parásito y arquitectura de dominios conservados entre sus ortólogas. Con el uso de predictores, determinamos que la proteína TcHMGB posee sitios conservados que podrían sufrir modificaciones postraduccionales (MPTs) afectando su localización celular, de manera análoga a lo observado en su ortóloga de mamíferos (mHMGB1). Con el fin de estudiar el comportamiento de TcHMGB y mHMGB1 durante una infección in vivo, en una primera etapa, caracterizamos un modelo de infección animal con la cepa Dm28c de T. cruzi. Este modelo no resultó letal para los animales y éstos presentaron un curso de infección con parasitemias elevadas y afección cardíaca y esplénica, los cuales evolucionaron favorablemente tras superar el pico de parasitemia. Por último, estudiamos la especificidad de anticuerpos comerciales anti-mHMGB1 y se determinó que no reconocen inespecíficamente a la proteína del parásito, por lo que serán útiles en ensayos futuros para el reconocimiento de mHMGB1 en las muestras sin interferencias generadas por TcHMGB.