Presentación cruzada de antígenos del parásito Trypanosoma cruzi

La Enfermedad de Chagas, ocasionada por el parásito flagelado Trypanosoma cruzi, es causal de al menos 10000 muertes por año. Además, unos 7 millones de personas se encuentran infectadas y 70 millones en riesgo de infección. Esto constituye a la enfermedad como una de las parasitosis de mayor incidencia en la Salud Pública en América Latina. Hasta la fecha no hay vacunas disponibles para prevenir la Enfermedad de Chagas, y el tratamiento, solo efectivo en la fase aguda, presenta elevada toxicidad y duración. Existe, por lo tanto, una necesidad urgente de desarrollar nuevas terapias con especial énfasis en aquellas dirigidas a potenciar la respuesta inmunitaria del hospedador contra T. cruzi, induciendo, de ser posible, una respuesta inmunológica a largo plazo. Las células T CD8+ son elementos clave en la defensa contra T. cruzi y, en consecuencia, la comprensión de los mecanismos de iniciación y estimulación de la respuesta CD8 durante las infecciones por parte de las células presentadoras de antígenos – particularmente las células dendríticas (CDs)– a través de la presentación antigénica, podría tener importantes implicancias en el diseño de vacunas o terapias alternativas a las actuales. Para poder presentar el antígeno y activar a células T CD8+, las CDs deben procesarlo y cargarlo en moléculas MHC de clase I. De acuerdo al origen del antígeno se distinguen la vía endógena (o presentación directa), si el antígeno se genera internamente, y la vía de presentación cruzada, si se trata de un antígeno exógeno previamente internalizado. Con el fin de comprender el mecanismo mediante el cual las CDs originan y expanden la respuesta anti-parasitaria, en este trabajo nos propusimos analizar si el contacto de las CDs con el patógeno influye en la activación de dichas células, entendiendo este proceso como esencial para la correcta propagación de la respuesta inmunitaria adaptativa mediada por células T CD8+. En primer lugar, se obtuvieron cultivos primarios de CDs derivadas de médula ósea (“BMDCs” por sus siglas en inglés) de ratón con un fenotipo apropiado (con expresión alta de los marcadores de superficie CD11c y CD11b analizados por citometría de flujo). Dichas células fueron co-cultivadas con tripomastigotes de T. cruzi (cepa Tulahuén) durante diferentes tiempos: 2, 4 y 18 horas y su activación se determinó mediante la inducción de la expresión de la molécula coestimuladora CD86. Sólo se evidenció activación de las BMDCs tras 18 horas de co-cultivo, y estos cultivos presentaron aproximadamente un 45% más de expresión de CD86 que aquellos cultivos sin T. cruzi. Finalmente se procedió a estudiar en forma preliminar si la maduración de las CDs por contacto con los parásitos estimulaba su capacidad de realizar presentación cruzada de antígenos xógenos. Este estudio sienta las bases para el análisis del mecanismo de presentación antigénica en el desarrollo de la respuesta inmunitaria contra T. cruzi.