Rol de la presentación cruzada de antígenos en la generación de la respuesta inmunitaria contra el parásito Trypanosoma cruzi

Abstract

La enfermedad de Chagas, causada por el protozoo intracelular Trypanosoma cruzi, constituye un importante problema de salud pública en América Latina y, debido a los movimientos migratorios, también en regiones no endémicas. A más de un siglo de su descubrimiento, no existe una vacuna aprobada para su prevención o tratamiento, y las terapias actuales presentan limitaciones en eficacia y toxicidad, especialmente en la fase crónica. La activación de linfocitos T CD8⁺ es clave para el control del parásito, por lo que comprender los mecanismos que inducen esta respuesta, en particular la presentación cruzada de antígenos por moléculas del complejo principal de histocompatibilidad clase I, reviste importancia tanto básica como aplicada. El objetivo general de esta tesis fue profundizar en los mecanismos que subyacen a la activación de linfocitos T CD8⁺ específicos frente a T. cruzi, con énfasis en la presentación cruzada por células dendríticas, y evaluar plataformas vacunales experimentales capaces de inducir respuestas inmunitarias protectoras mediadas por estos linfocitos. En el Capítulo 1 se analizó la relevancia funcional de la presentación cruzada dependiente de Sec22b en la respuesta frente a T. cruzi. Empleando un modelo murino con deleción específica de Sec22b en células dendríticas, se observó una menor activación de linfocitos T CD8⁺, asociada a mayor parasitemia y susceptibilidad a la infección. Además, se evidenció el reclutamiento de proteínas clave de la maquinaria de presentación cruzada (LAMP-1, calreticulina y tapasina) a la vacuola parasitófora, lo que apoya su posible participación en esta vía. El Capítulo 2 exploró una estrategia profiláctica basada en la transferencia adoptiva de células dendríticas derivadas de médula ósea activadas con LPS y cargadas ex vivo con el epítope inmunodominante TsKb20, derivado de transialidasas de T. cruzi. Esta inmunización generó una respuesta robusta de linfocitos T CD8⁺ específicos, productores de IFN-γ y con desarrollo de memoria efectora. Aunque la protección fue parcial y restringida a hembras, el modelo demostró ser útil para evaluar epítopes candidatos. En el Capítulo 3, se diseñó una estrategia vacunal con mayor potencial traslacional, basada en el direccionamiento antigénico in vivo mediante conjugados péptido-anticuerpo específicos para Clec9A, receptor expresado en células dendríticas convencionales de tipo 1, subpoblación clave para el inicio de respuestas inmunitarias frente a patógenos intracelulares. Esta formulación, combinada con el adyuvante Poly I:C, generó una población de linfocitos T CD8+ específicos con fenotipo efector, evidenciado por el aumento en la expresión de marcadores de activación y la producción de citoquinas tipo Th1, así como memoria efectora, y mostró una tendencia a la protección parcial frente a la infección aguda. En conjunto, los resultados destacan el rol de la presentación cruzada en la activación de linfocitos T CD8⁺ frente a T. cruzi y apoyan el desarrollo de vacunas racionales basadas en epítopes seleccionados mediante enfoques in silico o inmunopeptidómicos, con potencial aplicación terapéutica y/o preventiva frente a la enfermedad de Chagas.