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Ítem Acceso Abierto Deficiencia de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa eritrocitaria en Rosario(ederación Bioquímica de la Provincia de Buenos Aires, 2012-07) Acosta, Irma del Luján; Milani, Ángela Cristina; Pérez, Susana Mabel; Lanza, Olga; Detarsio, Germán A.Se estudió la actividad enzimática (AE) de la enzima glucosa-6-fosfato deshidrogenasa eritrocitaria (G6PD) y la movilidad electroforética (ME) en una población de hombres y mujeres de la ciudad de Rosario (provincia de Santa Fe), Argentina y zona de influencia. Para la determinación de AE se utilizó la técnica cinética de Glock y McLean y para la electroforesis de la enzima, la técnica de M.C. Rattazzi y L.C. Bernini en acetato de celulosa. Los valores normales de actividad enzimática (AE) para hombres y mujeres adultos fueron de 8,1 ± 1,4 UI G6PD/g Hb. Se demostró que los valores de AE son independientes de la edad, sexo y concentración de hemoglobina. En todos los grupos etarios estudiados no se observaron diferencias significativas de AE con respecto a los adultos normales a excepción de los neonatos que presentaron un significativo aumento de la misma, lo cual está directamente relacionado con las características fisiológicas de los eritrocitos del recién nacido. Entre los 686 individuos estudiados se detectaron 2 pacientes deficientes de G6PD, lo que dio una prevalencia de 0,3% y el patrón electroforético correspondiente a esta población fue 98% (n: 672) para G6PD B y 2% (n: 14) para G6PD con movilidad rápida tipo A.Ítem Acceso Abierto Physiological concentrations of unconjugated bilirubin prevent oxidative stress-induced hepatocanalicular dysfunction and cholestasis(Springer, 2014-02) Basiglio, Cecilia Lorena; Toledo, Flavia D.; Boaglio, Andrea C.; Arriaga, Sandra Mónica María; Ochoa, Justina E.; Sánchez Pozzi, Enrique Juan; Mottino, Aldo D.; Roma, Marcelo GabrielÍtem Acceso Abierto The Ca2+-calmodulin-Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase II pathway is involved in oxidative stress-induced mitochondrial permeability transition and apoptosis in rat hepatocytes(Springer, 2014-03-11) Toledo, Flavia D.; Pérez, Leonardo Martín; Basiglio, Cecilia Lorena; Ochoa, Justina E.; Sánchez Pozzi, Enrique Juan; Roma, Marcelo GabrielÍtem Acceso Abierto Relationship between genotoxic effects of breast cancer treatments and patient basal DNA integrity(BEGELL HOUSE INC, 2014-04-15) Capitaine Funes, Juan; Massa, Estefania; Cipulli, Germán; Benitez Gil, Alfonso; Capitaine Funes, Carlos; Tozzini, Roberto; Ghersevich, Sergio; Ceballos Mancini, María PaulaÍtem Acceso Abierto Radical oxygen species and bile secretion(Springer, 2014-05) Basiglio, Cecilia Lorena; Toledo, Flavia D.; Sánchez Pozzi, Enrique J.; Roma, Marcelo GabrielOxidative stress is a common feature in most hepatopathies. Accumulating evidences indicate that reactive oxygen species (ROS) induce a number of functional changes either deleterious or adaptive in the capability of the hepatocytes to produce bile and to secrete exogenous and endogenous compounds. This review is aimed to describe the mechanisms involved in these changes. For this purpose, we will summarize: 1. The current evidence that acutely induced oxidative stress is cholestatic, by describing the mechanisms underlying the hepatocyte secretory failure, including the disorganization of the actin cytoskeleton and its most noticeable consequences, that is, the impairment of tight-junctional structures and the endocytic internalization of canalicular transporters relevant to bile formation. 2. The role for oxidative-stress-activated signalling pathways in the pathomechanisms described above, particularly those involving Ca2+ elevation and its consequent activation via Ca2+ of “classical” and “novel” PKC isoforms. 3. The mechanisms involved in the adaptive response against oxidative stress mediated by ROS-responsive transcription factors, such as upregulation of GSH synthesis pathway, antioxidant enzymes, and hepatocellular efflux pumps. 4. The consequences on hepatocellular secretory function when this adaptive response can be surpassed by the sustained/high production of ROS. This deleterious effects include transcriptional and posttranscriptional changes in the expression of transporters relevant to bile formation, as has been shown to occur, for example, after long-term administration of aluminum to rats, in the Long-Evans Cinnamon rat (a model of chronic hepatic copper accumulation mimicking Wilson’s disease), and in ischemia-reperfusion injury.Ítem Acceso Abierto Estudio de factores genéticos asociados al estrés oxidativo en chagas(2014-06) Gerrard, Gabriela; Ceruti, María José; Lioi, Susana; Diviani, Romina; Beloscar, Juan; D'Arrigo, Mabel; Colegio de Bioquímicos de la Provincia de Santa Fe 2a. CircunscripciónIntroducción: Se ha sugerido que factores genéticos del huésped humano, factores ambientales y la variabilidad del T. cruzi podrían ser las principales determinantes de la prevalencia de la Enfermedad de Chagas (EC) y de sus manifestaciones clínicas. Aunque estos factores son probablemente responsables de la heterogeneidad de la EC, la susceptibilidad diferencial en áreas endémicas podría ser atribuible a factores genéticos del huésped. El hecho de que sólo una parte de la población que vive en zonas endémicas se infecta y que un tercio de las personas infectadas crónicamente desarrollan síntomas, remarcaría la importancia de factores genéticos en la susceptibilidad y desarrollo de la Miocardiopatía Chagásica Crónica (MCC). Procesos de inflamación crónica inducirían estrés oxidativo/nitrosativo y lipoperoxidación. Pacientes que cursan la forma crónica de EC, presentan altos porcentajes de inflamación del miocardio, con producción de citoquinas que inducirían una producción de ROS/RNS mayor que lo normal. La producción de ROS/RNS podría ser uno de los mecanismos efectores claves para el control de infecciones de T. cruzi in vivo.Ítem Acceso Abierto Biomarcadores de estrés oxidativo y miocardiopatía chagásica(2014-06) Lioi, Susana; Gerrard, Gabriela; Ceruti, María José; Diviani, Romina; D'Arrigo, Mabel; Beloscar, Juan; Colegio de Bioquímicos de la Provincia de Santa Fe 2a. CircunscripciónIntroducción: Se han sugerido numerosos mecanismos para explicar la patogénesis de la enfermedad cardiaca de Chagas (EC). La respuesta del hospedero a la infección persistente de T. cruzi, involucra la generación sostenida de especies reactivas (ROS/RNS) mediante células inflamatorias y la disfunción mitocondrial en el corazón, la cual conduce a la presentación de estrés oxidativo a largo plazo, tanto del tejido cardíaco como de los parásitos que se encuentran al interior de las células cardíacas.Ítem Acceso Abierto G-protein-coupled receptor 30/adenylyl cyclase/protein kinase A pathway is involved in estradiol 17ß-D-glucuronide-induced cholestasis(Wiley, 2014-10) Zucchetti, Andrés E.; Barosso, Ismael R.; Boaglio, Andrea C.; Basiglio, Cecilia Lorena; Miszczuk, Gisel Sabrina; Larocca, María Cecilia; Ruiz, María Laura; Davio, Carlos A.; Roma, Marcelo Gabriel; Crocenzi, Fernando A.; Sánchez Pozzi, Enrique JuanÍtem Acceso Abierto Estudio descriptivo de polimorfismos de enzimas antioxidantes en chagas(Universidad Nacional de Rosario, 2014-10) Gerrard, Gabriela; Lioi, Susana; Ceruti, María José; Diviani, Romina; Caffaratti, Julia Marina; Beloscar, Juan; D'Arrigo, Mabel; Universidad Nacional de RosarioObjetivo: Nos propusimos realizar un estudio descriptivo de las frecuencias genéticas (FG) de polimorfismos de superóxido dismutasa (SOD-Mn Ala9Val) y de catalasa (CAT C 272T), en pacientes chagásicos con cardiopatía chagásica (MCC n:25), sin cardiopatía chagásica (ECsinMCC n:20) y cardiopatía no chagásica (CnoC n:25), comparados con controles sanos (C n:55).Ítem Acceso Abierto Evaluation of urinary N-acetyl-beta-D-glucosaminidase as a marker of early renal damage in patients with type 2 diabetes mellitus(Sociedade Brasileira de Endocrinologia e Metabologia (SBEM), 2014-11) Bouvet, Beatriz Reina; Paparella, Cecilia Vicenta; Arriaga, Sandra Mónica María; Monje, Adriana L.; Amarilla, Ana María; Almará, Adriana MaríaÍtem Acceso Abierto Biomarcadores asociados a estrés oxidativo en miocardiopatía chagásica(2014-11-12) Caffaratti, Julia Marina; Lioi, Susana; Gerrard, Gabriela; Diviani, Romina; Ceruti, María José; Beloscar, Juan; D'Arrigo, Mabel; Sociedad Argentina de Investigación ClínicaObjetivo: El objetivo de este trabajo fue realizar un estudio descriptivo de biomarcadores de estrés oxidativo como actividad enzimática de superoxido dismutasa (SOD), catalasa (CAT), medición de punto final de la oxidación lipídica es el ensayo de Sustancias Reactivas del Ácido Tiobarbitúrico (TBARS).Ítem Acceso Abierto Structural determinants of Arabidopsis thaliana Hyponastic Leaves 1 function in vivo(Public Library of Science, 2014-11-19) Burdisso, Paula; Milia, Fernando; Schapire, Arnaldo L.; Bologna, Nicolás G.; Palatnik, Javier F.; Rasia, Rodolfo M.MicroRNAs have turned out to be important regulators of gene expression. These molecules originate from longer transcripts that are processed by ribonuclease III (RNAse III) enzymes. Dicer proteins are essential RNAse III enzymes that are involved in the generation of microRNAs (miRNAs) and other small RNAs. The correct function of Dicer relies on the participation of accessory dsRNA binding proteins, the exact function of which is not well-understood so far. In plants, the double stranded RNA binding protein Hyponastic Leaves 1 (HYL1) helps Dicer Like protein (DCL1) to achieve an efficient and precise excision of the miRNAs from their primary precursors. Here we dissected the regions of HYL1 that are essential for its function in Arabidopsis thaliana plant model. We generated mutant forms of the protein that retain their structure but affect its RNA-binding properties. The mutant versions of HYL1 were studied both in vitro and in vivo, and we were able to identify essential aminoacids/residues for its activity. Remarkably, mutation and even ablation of one of the purportedly main RNA binding determinants does not give rise to any major disturbances in the function of the protein. We studied the function of the mutant forms in vivo, establishing a direct correlation between affinity for the pri-miRNA precursors and protein activity.Ítem Acceso Abierto Estimation of the glomerular filtration rate in patients with glomerular pathology comparing CKD-EPI y MDRD-4 formulas(Instituto de Histología y Embriología “Dr. Mario H. Burgos” (IHEM-CONICET), 2015) Pezzarini, Eleonora; Rossi, María F.; Balbi, Bárbara; Monje, Adriana L.; Ocampo Alzate, Carlos; Basiglio, Cecilia Lorena; Rodenas, M.; Daniele, Stella Maris; Arriaga, Sandra Mónica María; Pelusa, Héctor Fabián; Sociedad Argentina de Investigación en Bioquímica y Biología MolecularMore than 40 formulas have been developed to estimate the glomerular filtration rate (GFR) involving creatinine concentration (Cr) as well as demographic and anthropometric variables. Modification of Diet in Renal Disease (MDRD-4) is the most recommended one. However, several studies state that Chronic Kidney Disease Epidemiology Collaboration (CKD-EPI) equation improves the results obtained with MDRD-4. Our aim was to compare the results of the estimated GFR (eGFR) obtained with both formulas in patients with glomerular pathology. We studied 32 individuals with glomerulopathies, age (mean±SD): 34±8 years old, 24 females (F) and 8 males (M). Cr was assessed by an automated method. Results were expressed as mean±SD. eGFR (ml/min) with CKD-EPI and MDRD-4 were 102±41 and 105±51 respectively; no significant differences were obtained between both formulas (p>0.05). Correlation coefficient between both equations was highly significant (r=0.93; p<0.0001). eGFR values were compared by sex and age. Results obtained for CKD-EPI and MDRD-4 by sex were: F: 107±38 and 111±51; M: 85±47 and 86±48, respectively. Results obtained for CKD-EPI and MDRD-4 by age were: < 34 years old: 109±41 and 111±55; ≥ 34 years old: 93±40 and 96±46, respectively. No significant differences were obtained for sex nor age (p>0.05). We conclude that both formulas could be used indistinctly as estimators of GFR in patients with glomerular pathology. For GFR values > normal values, eGFR with both equations would tend to a poorer correlation, then stratification and comparison of these values with those obtained from Cr clearance are suggested in order to determine which equation would be the best analytical predictor in patients with glomerulopathy and glomerular hyperfiltration.Ítem Acceso Abierto Importancia de la evaluación del estrés oxidativo en el semen humano(Prensa Medica Latinoamericana, 2015-03) Paparella, Cecilia Vicenta; Pavesi, Adriana Beatriz; Feldman, Rodolfo Néstor; Bouvet, Beatriz ReinaÍtem Acceso Abierto Fibroblast growth factor receptors (FGFRs) in human sperm: expression, functionality and involvement in motility regulation(Public Library of Science (PLOS), 2015-05-13) Saucedo, Lucía; Buffa, Gabriela Natalia; Rosso, Marina; Guillardoy, Tomás; Góngora, Adrián; Munuce, María José; Vázquez Levin, Mónica Hebe; Marín Briggiler, Clara; Dr. Baldi, Alberto provide the FGF2Fibroblast growth factors receptors (FGFRs) have been widely characterized in somatic cells, but there is scarce evidence of their expression and function in mammalian gametes. The objective of the present study was to evaluate the expression of FGFRs in human male germ cells, to determine sperm FGFR activation by the FGF2 ligand and their participation in the regulation of sperm motility. The expression of FGFR1, 2, 3 and 4 mRNAs and proteins in human testis and localization of these receptors in germ cells of the seminiferous epithelium was demonstrated. In ejaculated sperm, FGFRs were localized to the acrosomal region and flagellum. Sperm exposure to FGF2 caused an increase in flagellar FGFR phosphorylation and activation of extracellular signal-regulated kinase (ERK) and protein kinase B (PKB or Akt) signaling pathways. Incubation with FGF2 led to a significant increase in the percentage of total and progressive sperm motility, as well as in sperm kinematics. All responses were prevented by sperm preincubation with BGJ398, a specific inhibitor of FGFR tyrosine kinase activity. In addition to confirming the expression of FGFRs in germ cells of the human testis, our study describes for the first time the presence, localization and functionality of human sperm FGFRs, and provides evidence of the beneficial effect of FGF2 upon sperm motility.Ítem Acceso Abierto Análisis del perfil de citocinas en pacientes con complicaciones del embarazo : estudio preliminar(Asociación Bioquímica Argentina, 2015-06-14) Pezzarini, Eleonora; Balbi, Bárbara; Trucco Boggione, Carolina; Cotorruelo, Carlos; Bottai, Hebe; Pezzotto, Stella; Daniele, Stella; Arriaga, Sandra Mónica María; Pelusa, H. Fabián; Asociación Bioquímica ArgentinaLa hipertensión gestacional (HG), es una de las entidades obstétricas más frecuentes y, tal vez, la que más repercusión desfavorable ejerce sobre el producto de la concepción y a su vez sobre la madre. La preeclampsia (PE) es una enfermedad multisistémica, de causa desconocida y es una de las principales causas de morbimortalidad materna y perinatal. El hecho de que el sistema inmunitario materno permita la implantación de un embrión sin complicaciones representa una manifestación de tolerancia inmunológica. Se postula que para un desarrollo trofoblástico normal, sería necesaria una expresión de citocinas del tipo Th2. En cambio, si el perfil predominante fuera el Th1, existiría una hostilidad inmunológica hacia el trofoblasto, que traería como consecuencia una disminución del flujo sanguíneo a la unidad feto-placentaria, isquemia y finalmente necrosis. El objetivo del trabajo fue analizar la expresión de citocinas en mujeres con trastornos del embarazo tales como la HG y la PE y analizar la correlación entre estas citocinas y la presencia de las patologías mencionadas. Para ello se trabajó con un grupo de pacientes con diagnóstico de HG (n=6), de PE (n=3) y como grupo control (GC) se incluyeron embarazadas sin patologías asociadas (n=10). Todas provenían del Servicio de Ginecología y Obstetricia del Hospital Provincial del Centenario y firmaron el consentimiento informado. Se excluyeron aquellas pacientes que presentaban hipertensión arterial primaria, evidencias clínico-bioquímicas de hipertensión secundaria, diabetes, insuficiencia renal, proteinuria franca (>1g/24 h) o infección urinaria. Se analizó la expresión de las siguientes citocinas con el fin de establecer el patrón de respuesta, Th1 mediante la expresión de interferón gamma (IFNγ) y Th2 mediante la expresión de interleucina-4 (IL-4). El protocolo de trabajo incluyó los siguientes pasos: 1) Extracción sanguínea utilizando EDTA como anticoagulante, 2) Separación de las células mononucleares utilizando gradiente de Ficoll-Hypaque, 3) Extracción del ARN, 4) Comprobación de la integridad del ARN, 5) Retrotranscripción, 6) Integridad del ADNc y 7) Reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real. La determinación de las concentraciones relativas de IFNγ e IL-4, se efectuó utilizando el gen de la gliceraldehído 3 fosfato deshidrogenasa como gen de referencia. Los resultados obtenidos [mediana (rango)] para IFNγ en las embarazadas patológicas y en el GC fueron respectivamente: 0,55 (0,14-23,74) y 0,96 (0,12-14,23) y para IL-4: 0,88 (0,17-3,44) y 2,5 (0,27-18,5). No hubo diferencia significativa en los niveles de IL-4 ni de IFNγ entre las mujeres con embarazo patológico y el GC (p=0,076 y p=0,438; respectivamente). El coeficiente de correlación de rangos de Spearman entre ambas variables fue -0,100 (p=0,77) para las embarazadas patológicas y -0,09 (p=0,78) para el GC. Se concluye que, en la muestra analizada, no se evidencia un desequilibrio entre los perfiles Th1 yTh2 que permita adjudicarle un rol patogénico en las complicaciones hipertensivas del embarazo.Ítem Acceso Abierto Induced folding in RNA recognition by Arabidopsis thaliana DCL1(Oxford University Press, 2015-06-22) Suárez, Irina Paula; Burdisso, Paula; Benoit, Matthieu P. M. H.; Boisbouvier, Jérôme; Rasia, Rodolfo M.Ítem Acceso Abierto Análisis de factores genéticos de riesgo asociados al estrés oxidativo en miocardiopatía chagásica crónica(2015-08) Diviani, Romina; Lioi, Susana; Gerrard, Gabriela; Ceruti, María José; Beloscar, Juan; D'Arrigo, Mabel; Colegio de Bioquímicos de la Provincia de Santa Fe 1a. CircunscripciónINTRODUCCIÓN: Diferentes estudios sugieren que el huésped podría responder al estrés oxidativo inducido por el Trypanosoma cruzi (Tc), mediante la activación de la defensa antioxidante. En la Miocardiopatía Chagásica Crónica (MCC), la inflamación progresiva podría modificar el estado antioxidante celular. Enzimas involucradas en el estrés oxidativo controlarían la generación de especies reactivas del oxígeno.Ítem Acceso Abierto Estudio descriptivo de biomarcadores de estrés oxidativo e inflamación en miocardiopatía chagásica(Asociación Bioquímica Argentina, 2015-08) Diviani, Romina; Lioi, Susana; Gerrard, Gabriela; Caffaratti, Julia Marina; Ceruti, María José; Martí, María Belén; Beloscar, Juan; D'Arrigo, Mabel; Asociación Bioquímica ArgentinaIntroducción: Estudios indican que reacciones inflamatorias en el corazón se relacionarían con mayor producción de citoquinas que inducirían una mayor generación de especies reactivas de oxígeno y de nitrógeno (ROS/RNS). En la actualidad, se sugiere que el estrés oxidativo constante en el corazón contribuiría a la Miocardiopatía Chagásica Crónica (MCC).Ítem Acceso Abierto Análisis de biomarcadores urinarios en la nefropatía lúpica activa(Sociedad Argentina de Nefrología, 2015-09-18) Monje, Adriana L.; Balbi, Bárbara; Pezzarini, Eleonora; Pelusa, H. Fabián; Basiglio, Cecilia Lorena; Daniele, Stella; Rossi, María; Rodenas, Martín; Sarano, Héctor; Bottai, Hebe; Arriaga, Sandra Mónica María; Sociedad Argentina de NefrologíaIntroducción: La lipocalina asociada a la gelatinasa de neutrófilo (NGAL) tiene un efecto protector sobre los túbulos renales por lo cual se la propuso como un biomarcador para la nefropatía lúpica activa (NLA). Por otro lado se encontró un aumento significativo de la transferrina urinaria (Tf) en pacientes con NL asociada a la recaída renal. La β2 microglobulina (β2MG) atraviesa la membrana glomerular y es reabsorbida y degradada en el túbulo proximal. La disfunción tubular asociada al proceso inflamatorio inmune y a la proteinuria glomerular produce elevaciones en su concentración urinaria. Objetivo: Evaluar los niveles urinarios de NGAL, Tf y β2MG en pacientes con NL activa (NLA) y cuál de estos parámetros bioquímicos exhibe mayor correlación con la actividad de la enfermedad. Material, métodos y resultados: Se trabajó con pacientes del Servicio de Nefrología del Hospital Provincial del Centenario con diagnóstico de NLA (n=9) y como grupo control pacientes con NL no activa (NLNA; n=22). Los biomarcadores urinarios se determinaron en orina aislada por EIA de origen comercial y se expresaron en relación a la creatinina urinaria (método cinético). Los resultados obtenidos (media±DE) para NGAL (ng/gCr), Tf (ng/gCr) y β2MG (μg/gCr) fueron respectivamente: NLA: 190±147, 564±553 y 38±48; NLNA: 100±72, 878±548 y 39±64. Solamente se encontraron diferencias estadísticamente significativas para NGAL entre ambos grupos (p<0,05). Además, se observó una asociación levemente significativa entre NGAL y Tf para el grupo NLA (r=0,6; p=0,0897). Conclusión: En la muestra analizada, de los tres biomarcadores estudiados, NGAL sería el mejor indicador de actividad renal en el lupus. La correlación positiva entre NGAL y Tf obtenida en el grupo con NLA sugiere la presencia de un daño glomérulotubular en estos pacientes, el cual no se vio corroborado por la β2MG.