Examinando por Autor "Paredes, Franco"

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    ÍtemEmbargo
    Diseño, desarrollo y validación funcional de un ensayo de secuenciación de paneles de genes para el diagnóstico genético
    (Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas., 2025) Paredes, Franco; Colaneri, Alejandro; Baya , Ariel
    En este trabajo se abordó el desarrollo y la validación funcional de una técnica para la obtención de variantes genéticas humanas a partir de una muestra de sangre. Se planteó un protocolo que consiste en los pasos que inician en la extracción de ADN a partir de una muestra con EDTA. Se adaptó un protocolo comercial para la captura por hibridación de secuencias blanco. Una vez obtenido el archivo fastq se le realizaron los análisis de calidad correspondientes, los mismos resultaron satisfactorios. El mapeo de las secuencias se llevaron a cabo con el software bwa. A partir de este alineamiento, se procedió a realizar las prácticas recomendadas por el Broad Institute para la obtención de variantes. El análisis final consistió en la búsqueda en bases de datos de las más de 400 variantes encontradas para la identificación de su significancia clínica. Se deja asentado que para la validación clínica final del método se deberá contar con controles extra y mayor cantidad de muestras.
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    ÍtemAcceso Abierto
    Practical considerations to establish a validated platform for pooled detection of SARS-CoV-2 by droplet digital PCR
    (Public Library of Science, 2022-11-04) Heckel, Sofía; Pacini, Antonella; Paredes, Franco; Petreli, María Victoria; Perez, Marilina; Adriani, Natalia; Ibarra, Guadalupe; Menzella, Hugo G.; Colaneri, Alejandro; Sesma, Juliana
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    ÍtemAcceso Abierto
    Ready for new waves: optimizing SARS-CoV-2 variants monitoring in pooled samples with droplet digital PCR
    (Frontiers Media, 2024-01-11) Pacini, Antonella; Paredes, Franco; Heckel, Sofía; Ibarra, Guadalupe; Petreli, María Victoria; Perez, Marilina; Agnella, Yanina; Piskulic, Laura; Allasia, María Belén; Caprile, Luis; Colaneri, Alejandro; Sesma, Juliana
    Introduction: The declaration of the end of the Public Health Emergency for COVID-19 on May 11th, 2023, has shifted the global focus led by WHO and CDC towards monitoring the evolution of SARS-CoV-2. Augmenting these international endeavors with local initiatives becomes crucial to not only track the emergence of new variants but also to understand their spread. We present a cost-effective digital PCR-based pooled sample testing methodology tailored for early variant surveillance. Methods: Using 1200 retrospective SARS-CoV-2 positive samples, either negative or positive for Delta or Omicron, we assessed the sensitivity and specificity of our detection strategy employing commercial TaqMan variant probes in a 1:9 ratio of variant-positive to variant-negative samples. Results: The study achieved 100% sensitivity and 99% specificity in 10-sample pools, with an Area Under the Curve (AUC) exceeding 0.998 in ROC curves, using distinct commercial TaqMan variant probes. Discussion: The employment of two separate TaqMan probes for both Delta and Omicron establishes dual validation routes, emphasizing the method’s robustness. Although we used known samples to model realistic emergence scenarios of the Delta and Omicron variants, our main objective is to demonstrate the versatility of this strategy to identify future variant appearances. The utilization of two divergent variants and distinct probes for each confirms the method’s independence from specific variants and probes. This flexibility ensures it can be tailored to recognize any subsequent variant emergence, given the availability of its sequence and a specific probe. Consequently, our approach stands as a robust tool for tracking and managing any new variant outbreak, reinforcing our global readiness against possible future SARS-CoV-2 waves.