Examinando por Autor "Dapino, Dora"

Mostrando 1 - 4 de 4
  • Miniatura
    ÍtemAcceso Abierto
    Comportamiento del dimorfismo sexual en peso corporal en función de la edad en híbridos experimentales de pollos camperos
    (2012-11-30) Librera, José Ernesto; Álvarez, Marianela; Lucach, Silvana; Serrano, Celeste; Velázquez, Juliana; Canet, Zulma Edith; Dottavio, Ana María; Di Masso, Ricardo José; Librera, José Ernesto [0000-0003-3592-9656]; Canet, Zulma Edith [0000-0002-4993-3173]; Dottavio, Ana María [0000-0002-2402-6702]; Di Masso, Ricardo José [0000-0001-6221-5523]; Sociedad de Biología de Rosario
    Las diferencias fenotípicas entre sexos son comunes en la mayoría de las especies animales si bien no responden a una regla de aplicación general en tanto los machos pueden ser más grandes o más pequeños que las hembras según los casos. Esta particularidad ha llamado la atención de los biólogos interesados en los aspectos evolutivos del carácter respecto de los cuales se han ensayado diversas interpretaciones. Una de las condiciones requeridas para la evolución del dimorfismo entre sexos es que el carácter bajo consideración esté determinado por genes con expresión diferencial en machos y en hembras. Los trabajos de campo han demostrado una rápida divergencia fenotípica entre sexos en diversas especies pese a que las habitualmente altas correlaciones genéticas entre sexos para medidas morfométricas llevan a predecir en teoría una baja tasa evolutiva para el carácter. En los pollos parrilleros industriales el dimorfismo sexual constituye la principal causa de falta de uniformidad en peso corporal de los lotes mixtos –machos y hembras criados en conjunto, razón por la cual, ante el requerimiento de contar con grupos de peso homogéneo, el manejo productivo se orienta a la cría de los sexos por separado. La mayor velocidad de crecimiento de los machos respecto de las hembras sumado al hecho que el momento de faena está determinado fundamentalmente por el peso requerido por el mercado y en segunda instancia por la edad de las aves, determina diferencias en el tiempo requerido para alcanzar el peso de sacrificio y, por lo tanto, en la edad de faena de acuerdo al sexo. En el caso del pollo campero, la problemática productiva asociada con la presencia de dimorfismo sexual para peso corporal adquiere otras connotaciones. Si bien el peso a la faena mantiene su importancia, el consumidor suele asociar la imagen de este tipo de ave con un producto más pesado que el parrillero o broiler comercial, y además, con cierta variabilidad en el tamaño corporal. Por otra parte, en el pollo campero la edad de faena adquiere cierta preeminencia en tanto se trata de genotipos con menor velocidad de crecimiento cuya producción se encuentra protocolizada y cuyo sacrificio debe llevarse a cabo entre los 70 y los 90 días de edad. El objetivo de este trabajo fue caracterizar en forma dinámica el dimorfismo sexual en peso corporal exhibido por dos híbridos experimentales de tres vías de pollo campero en comparación con un genotipo de referencia. Se utilizaron machos y hembras, de los siguientes grupos genéticos (a) híbrido de tres vías Campero Casilda producto del cruzamiento de hembras híbridas (sintética A x sintética ES) por machos de la sintética paterna AH'; (b) híbrido de tres vías Campero Pergamino, producto del cruzamiento de hembras híbridas (sintética ES x sintética A) por machos de la sintética paterna AH' y (c) Campero INTA, población de referencia, producto del cruzamiento de hembras de la sintética materna E por machos de la sintética paterna AH'. Cuarenta individuos de cada subgrupo genotipo-sexo se pesaron a intervalos semanales entre el nacimiento y las 11 semanas de edad. Como indicadores de dimorfismo sexual se definieron dos índices: (1) el Índice de dimorfismo sexual absoluto (DSA) calculado como la diferencia entre el peso promedio de los machos y el peso promedio de las hembras registrados a la misma edad cronológica y (2) el índice de dimorfismo sexual relativo (DSR) calculado como el cociente entre el peso promedio de los machos y el peso promedio de las hembras registrados a la misma edad cronológica. El patrón temporal de ambos indicadores se evaluó por regresión no lineal. El DSA mostró un comportamiento sigmoideo compatible con el modelo logístico [IDSA=A*(1+B*e^(-k*t))^(-1)] donde A=valor asintótico del índice, B = constante de integración sin valor biológico y k = velocidad de aproximación al valor asintótico] mientras que el DSR mostró un comportamiento lineal. La bondad del ajuste se evaluó a través de la convergencia en una solución, el valor del coeficiente de determinación no lineal (R2) y la aleatoriedad de los residuales (test de rachas o ciclos) en el caso del DSA y con los dos últimos criterios en el caso del DSR. Para ambos índices se observó un buen ajuste del correspondiente modelo matemático. La comparación de las curvas resultantes del ajuste logístico indicó diferencias significativas (F=5,864; P =0,0005) entre grupos (diferentes trayectorias para cada grupo genético) en el comportamiento dinámico del DSA. Dado que las comparaciones de los parámetros considerados por separado fueron no significativas (P>0,05) el significado observado en la comparación global es atribuible a la diferente combinación de valores de A y k. Los híbridos experimentales, con valores muy similares de tasa de maduración se diferenciaron en sus patrones globales (F=7,323; P=0,002), presentando Campero Casilda (>A) mayores valores a lo largo de todo el lapso estudiado. La combinación de una alta tasa de maduración para DSA de Campero INTA sumada a su menor dimorfismo asintótico permitió diferenciar a este genotipo de Campero Pergamino (F=9,156; P=0,00056) pero no de Campero Casilda (F=1,594; P=0,226). Con respecto al IDSR, no se observaron diferencias entre grupos en el valor de la pendiente (F=1,951; P=0,160; b común = 0,0358) pero si en las alturas de las rectas de regresión (F=24,6; P<0,0001, Campero INTA > Campero Casilda > Campero Pergamino). Los resultados muestran que los machos ya son más pesados que las hembras desde el nacimiento y que la relación entre los pesos de ambos sexos (DSR) aumenta con la edad corroborando la evidencia a este respecto que indica que el dimorfismo se acrecienta cuando los animales se acercan a su madurez sexual (pendientes positivas y significativas) pero manteniendo constantes las diferencias entre grupos (pendientes iguales). Durante el período de cría y terminación Campero Casilda mostró mayor DSA que Campero Pergamino debido al mayor valor de A y k (mayor valor asintótico y mayor velocidad de aproximación al mismo) lo que permite predecir menor uniformidad en los lotes mixtos del primero de los dos híbridos experimentales. Si bien Campero INTA presenta al principio del período de crianza mayor DSA dado su mayor tasa de maduración para el carácter, el menor valor asintótico determina que a la edad de faena presente un DSA menor a Campero Casilda y similar a Campero Pergamino. Si estas aves se destinan a la producción de carne independientemente del sexo debería elegirse el grupo con menor DSA y menor aumento de DSR (Campero INTA) dado que permitiría la cría en lotes mixtos con mayor uniformidad. Si, por el contrario se utilizan como poblaciones doble propósito y las hembras se reservan como ponedoras debería elegirse el grupo con mayor DSA y mayor aumento de DSR (Campero Casilda) y criar los sexos por separado.
  • Miniatura
    ÍtemAcceso Abierto
    Conformación corporal a la faena en machos y hembras de dos híbridos experimentales de tres vías de pollos camperos
    (2012-11-30) Advínculo, Sabina Andrea; Martines, Araceli; Trillo Nunes, Mariana; Sciutto, Anabel Carla; Canet, Zulma Edith; Dottavio, Ana María; Di Masso, Ricardo José; Advínculo, Sabina Andrea [0000-0002-1761-4389]; Martines, Araceli [0000-0003-3887-6545]; Canet, Zulma Edith [0000-0002-4993-3173]; Dottavio, Ana María [0000-0002-2402-6702]; Di Masso, Ricardo José [0000-0001-6221-5523]; Sociedad de Biología de Rosario
    Si bien en producción animal en general así como en la avicultura de carne el término conformación corporal se asocia habitualmente con la cantidad y la distribución de las masas musculares, el mismo hace referencia al sistema esquelético de los individuos analizados. En las aves de carne, por ejemplo, se considera ventajosa una conformación corporal rectangular, con una longitud, ancho y profundidad corporales bien balanceados. Los criterios de mejoramiento aplicados en las poblaciones de reproductores destinados a la producción de pollos parrilleros se caracterizaron durante mucho tiempo por ejercer toda la presión selectiva sobre el carácter ganancia diaria de peso. Posteriormente, ante la evidencia de las respuestas correlacionadas indeseables que acompañaron a la selección por peso, dichos criterios pasaron a tomar en consideración aspectos relacionados con la conformación y, en tal sentido, comenzaron a recibir cada vez más atención por parte de los genetistas ciertos cortes carniceros particulares. Tal fue el caso de los muslos y, fundamentalmente, de la pechuga término este último con el que se designan colectivamente a los músculos pectorales -gran pectoral, mediano pectoral y pequeño pectoral- de alto valor comercial. Se ha informado que la selección por peso corporal produce como respuesta correlacionada un aumento en la proporción de carne de pechuga y que la deposición de carne de pechuga aumenta progresivamente con la edad del ave. Sin embargo, la inclusión de este tipo de caracteres en los programas de mejoramiento por selección se enfrenta con la imposibilidad de obtener mediciones directas de los mismos ya que tal registro requiere del sacrificio de las aves evaluadas. Para superar esta restricción metodológica, se han ensayado alternativas de selección indirecta basadas en caracteres fácilmente medibles en el animal vivo, altamente correlacionados con el carácter de interés con valores de heredabilidad que posibilitaran su mejora por selección artificial. Entre las mediciones más accesibles que se han propuesto para predecir el peso de la pechuga a la faena pueden mencionarse el largo y el ancho de la misma medidos in vivo así como otras medidas lineales registradas también sobre el animal vivo vinculadas con la conformación corporal deseada. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto del grupo genético, del sexo y de la respectiva interacción simple entre ambos efectos principales sobre un conjunto de medidas lineales asociadas con la base ósea que determina la conformación de las aves en el momento de la faena. Se utilizaros aves, machos y hembras, de los siguientes grupos genéticos (n = 30 aves por subgrupo genotipo-sexo) (a) híbrido de tres vías Campero Casilda producto del cruzamiento de hembras híbridas (A x ES) por machos de la sintética paterna AH’, (b) híbrido de tres vías Campero Pergamino, producto del cruzamiento de hembras híbridas (ES x A) por machos de la sintética paterna AH’y (c) Campero INTA, población de referencia, producto del cruzamiento de hembras de la sintética materna E por machos de la sintética paterna AH’. El día previo a la faena se registraron las siguientes medidas morfométricas: la longitud de la pechuga (LONPEC: distancia en cm entre el vértice de la quilla del esternón y el sitio de unión de las clavículas), el ancho de la pechuga (ANCPEC: ancho del tórax, en cm, a la altura de la unión de las clavículas) de la pechuga, la longitud dorsal parcial (porción de la longitud anterior tomada en su inicio a la altura del húmero y en su porción final a la altura del fémur), el ancho dorsal inter-húmeros (ANCHUM: distancia en cm entre húmeros), el ancho dorsal inter-fémures (ANCFEM: distancia en cm entre fémures) y la circunferencia corporal (CIRCOR: longitud, en cm, a nivel de la porción anterior del borde del esternón, pasando por debajo de las alas y por delante de las patas) y se calculó la superficie de la pechuga [SUPECH = (largo x ancho) / 2]. El efecto del sexo y el grupo genético como efectos principales y de la interacción simple entre ambos se evaluó con un análisis de la variancia correspondiente a un experimento factorial 3 x 2 (tres grupos genéticos por dos sexos). Se observó un efecto significativo (P<0,05) de la interacción grupo genético x sexo sobre las variables longitud dorsal (atribuible a Campero INTA que presentó un valor promedio menor a ambos híbridos en machos y mayor en hembras), ancho inter-humeros (atribuible a las hembras Campero Casilda que mostraron un menor valor promedio del carácter hecho no observado en el caso de los machos) y ancho inter-fémures (atribuible a que en machos el menor valor promedio correspondió a Campero INTA y en hembras a Campero Casilda). Si bien la presencia de interacciones significativas dificulta la interpretación de los efectos principales, el efecto sexo fue significativo para todos los caracteres a excepción de la superficie de la pechuga. Sólo se observaron efectos significativos del grupo genético sobre el ancho inter-húmeros y sobre el ancho inter-fémures, explicados en ambos casos por el menor valor registrado en las hembras Campero Casilda. Se concluye que a la faena, los machos presentan, independientemente del grupo genético pechugas más largas y angostas que las hembras pero que la compensación de ambas diferencias daría como resultado pechugas de igual superficie en los dos sexos. Los machos presentan un cuerpo de mayor longitud que las hembras (mayor longitud dorsal), acompañado de un menor ancho entre húmeros a excepción de Campero Casilda que no mostró dimorfismo sexual para el carácter y de un mayor ancho entre fémures, particularmente en Campero Casilda que mostró el mayor dimorfismo para el carácter indicando un ensanchamiento corporal hacia caudal. En la avicultura industrial, el pollo para carne conocido familiarmente como pollo parrillero o broiler es un tipo de ave de ambos sexos, que se caracteriza por presentar, además de una rápida velocidad de crecimiento, el notorio desarrollo de sus masas musculares, principalmente en la región pectoral (pechuga) y en las extremidades (muslos), que le confiere una conformación "redondeada", diferente de la que tienen las poblaciones de aves para postura. Los resultados muestran que las aves de crecimiento lento evaluadas en este trabajo, si bien presentan un buen desarrollo muscular a diferencia de los antiguos pollos de campo, mantienen cierto grado de dimorfismo sexual propio de la especie y exhiben un fenotipo que les es característico, que puede ser descrito como "tipo faisán" que junto con el plumaje pigmentado los identifica y distingue de los híbridos industriales.
  • Miniatura
    ÍtemAcceso Abierto
    Estudio dinámico de la eficiencia de conversión en machos y hembras de dos híbridos experimentales de tres vías de pollos camperos
    (2012-11-30) Fernández, Ramiro; Antruejo, Alejandra Edit; Lagostena, María Gabriela; Canet, Zulma Edith; Dottavio, Ana María; Di Masso, Ricardo José; Fernández, Ramiro [0000-0003-2763-8429]; Antruejo, Alejandra Edit [0000-0003-3898-989X]; Canet, Zulma Edith [0000-0002-4993-3173]; Dottavio, Ana María [0000-0002-2402-6702]; Di Masso, Ricardo José [0000-0001-6221-5523]; Sociedad de Biología de Rosario
    La eficiencia de conversión es un carácter complejo que resulta de la interacción de múltiples factores que incluyen, entre otros, el metabolismo basal, la curva de crecimiento, el apetito, el comportamiento del animal, la composición de la carcasa, la digestibilidad del alimento, etc. Esta variable es considerada una medida cruda de la eficiencia biológica y, en tal sentido, se la expresa como el cociente entre lo producido y lo consumido. En las especies de interés productivo entre las que se cuentan las aves para carne, se utiliza como indicador el cociente inverso: alimento consumido por unidad de peso corporal ganado. El conocimiento de la base genética de la eficiencia condujo a incorporarla como criterio en la selección por múltiples caracteres y durante la década de los 90’ se puso énfasis en el estudio de los factores fisiológicos subyacentes a la selección por eficiencia, tales como la actividad de enzimas digestivas o el metabolismo de la energía o de las proteínas. Además de los adelantos teóricos relativos a la selección por este carácter de importancia económica, la evolución de las técnicas de biología molecular permitió utilizar marcadores dispersos en el genoma para buscar segmentos cromosómicos (QTL) que co-segregan con caracteres de importancia económica y cuya identificación y posterior aplicación como marcadores genéticos en los programas de mejoramiento puede mejorar la respuesta a la selección. En 1999 se informó sobre el primer “scan” total efectuado en pollos para QTL relacionados con la tasa de crecimiento y la eficiencia alimenticia. El pollo campero es un ave de crecimiento más lento que los parrilleros comerciales, que se cría en semicautiverio, en el marco de una avicultura no tradicional que busca satisfacer la demanda por productos naturales. En este sentido, representa una modalidad productiva de aves de carne más ecológica que contempla aspectos vinculados con el bienestar animal. Dada la alta incidencia de la alimentación sobre los costos totales en la producción avícola y la menor tasa de aumento de peso diario de las aves camperas, la caracterización de la relación consumo-crecimiento adquiere relevancia en este tipo de poblaciones en tanto presenta connotaciones propias diferentes a las descritas en el caso de la avicultura industrial. El objetivo de este trabajo fue caracterizar el comportamiento de la eficiencia de conversión, en machos y hembras de dos híbridos experimentales de tres vías de pollo campero en comparación, como genotipo de referencia, con una versión de Campero INTA que utiliza como padre una sintética mejorada por tasa de crecimiento, utilizando un criterio estático (a edad fija) y un criterio dinámico (comportamiento en función de la edad cronológica). Se utilizaron machos y hembras, de los siguientes grupos genéticos: (a) híbrido de tres vías Campero Casilda producto del cruzamiento de hembras híbridas (sintética A x sintética ES) por machos de la sintética paterna AH', (b) híbrido de tres vías Campero Pergamino, producto del cruzamiento de hembras híbridas (sintética ES x sintética A) por machos de la sintética paterna AH' y (c) Campero INTA producto del cruzamiento de hembras de la sintética materna E por machos de la sintética paterna AH'. A partir de los 36 días de vida, quince aves de cada grupo genético y sexo se alojaron en jaulas individuales para el control del consumo voluntario de alimento. Luego de un período de acostumbramiento de siete días, cada ave fue pesada semanalmente y se determinó su consumo diario individual en cinco períodos de una semana de duración comprendidos entre los 42 y los 77 días de edad [Período 1: 42-49 días; Período 2: 49-56 días; Período 3: 56-63 días; Período 4: 63-70 días; Período 5: 70-77 días]. Estos datos se utilizaron para calcular la eficiencia de conversión definida como el aumento de peso por unidad de alimento consumido. El efecto del grupo genético, del sexo y de la respectiva interacción simple entre ambos (interacción grupo genético x sexo) sobre la eficiencia de conversión de alimento en el período total (42-77 días de edad) se evalúo con un análisis de la variancia correspondiente a un experimento factorial 3 x 2 (tres grupos genéticos x dos sexos). El comportamiento dinámico de la eficiencia de conversión en función de la edad en cada grupo genético –machos y hembras por separado- se estudió por regresión lineal. El efecto del grupo genético sobre el valor de la pendiente y de la altura de las rectas de regresión se evaluó con un análisis de la covariancia. No se observaron diferencias estadísticamente significativas entre los grupos genéticos en la eficiencia de conversión alimenticia en el período analizado. Con relación al significado del efecto sexo los machos fueron más eficientes que las hembras en todo el período analizado hecho posiblemente asociado a su mayor tasa de crecimiento derivada en parte de su menor madurez. No se observó interacción significativa entre los dos efectos principales considerados. Se concluye que en relación con el carácter analizado los tres grupos genéticos son equivalentes. La utilización de cualquiera de estos genotipos dentro de un esquema productivo de doble-propósito permitiría hacer uso de la mayor eficiencia de los machos que se destinan a la producción de carne mientras que las hembras destinadas a postura, dada la correlación negativa entre peso corporal y producción de huevos, serán restringidas en el consumo de alimento como es usual en el caso de las reproductoras pesadas. Por último debe tenerse en cuenta que los valores de conversión alimenticia informados (relación de conversión > a 3 kg de alimento por kg de aumento de peso) son mayores que los habituales en el modelo productivo intensivo circunstancia que debe ser contemplada por las propuestas de producción de carne aviar en el marco de sistemas más o menos extensivos que ponen énfasis en la preservación del bienestar animal. Finalmente, los consumidores vinculados con la demanda de este tipo de producto deben tener en cuenta que la producción de carne a partir de genotipos con menor velocidad de crecimiento es un proceso más costoso en términos de alimentación y, en tal sentido, deben estar dispuestos a afrontar un mayor precio de venta del producto final.
  • Miniatura
    ÍtemAcceso Abierto
    Proteínas de unión a heparina en espermatozoides de verraco y su relación con la fecundidad
    (No disponible, 2010) Dapino, Dora; Cabada, Marcelo O.; Marini, Patricia E.
    1. Métodos para la evaluación de la integridad estructural del acrosoma El acrosoma almacena enzimas y proteínas cruciales para la interacción con el ovocito durante la fecundación, por lo que su evaluación resulta esencial. Las técnicas que evalúan el estado acrosomal (lectinas fluorescentes, contraste de fases, por ejemplo) no representan una alternativa accesible a los fines prácticos debido a que insumen mucho tiempo, su desarrollo es complejo o requieren de un equipo específico e insumos de alto costo que los hace inaplicables a un plan rutinario de control de calidad en los establecimientos que procesan semen porcino. Las técnicas que utilizan colorantes ofrecen una alternativa interesante tanto con fines de investigación, por su estabilidad, como con fines prácticos. Sin embargo, muy pocas de ellas han sido validadas con otras técnicas de evaluación estandarizadas. En este trabajo se evaluó la sensibilidad de la tinción Wells & Awa en detectar cambios paulatinos en la estructura acrosomal comparándola con técnicas estandarizadas como contraste de fases y Giemsa, mostrándose igualmente eficaz en dicha detección por acción de un inductor de reacción acrosómica como el ionóforo o por efecto de la conservación, lo que resulta de utilidad en los establecimientos que almacenan dosis seminales durante varios días. Las ventajas de esta técnica de tinción con respecto a otras, son la posibilidad de utilizar un simple microscopio de campo claro y la estabilidad de los preparados que hace que puedan ser guardados y observados más tarde. Por otro lado, su escaso tiempo de incubación y secado que favorece el mantenimiento de la integridad de las membranas, ofreciendo resultados más fieles y repetibles que otras tinciones de su misma clase. Estas características hacen que esta tinción posea la suficiente versatilidad para ser propuesta como de elección en los exámenes rutinarios de calidad seminal relacionados con la integridad estructural del acrosoma, tanto en la práctica diaria en los establecimientos productores de dosis de semen porcino destinadas a Inseminación Artificial, como en el laboratorio de Investigación. 2. Métodos de evaluación del estado fisiológico del espermatozoide En este trabajo se probaron las técnicas de CTC e Ionóforo de calcio A23187 con el fin de detectar, mediante técnicas microscópicas, las modificaciones estructurales de la membrana del espermatozoide como reflejo de cambios en su estado metabólico. Ambas técnicas mostraron ser eficientes en cuanto a su capacidad de diferenciar y mostrar la evolución del proceso de capacitación como consecuencia de la incubación de los espermatozoides de cerdo en medios capacitantes, obteniéndose valores de capacitación que coinciden con los habitualmente hallados en la especie porcina. 3. Rol de glucosaminoglicano heparina sobre la fisiología del espermatozoide porcino El efecto del glicosaminoglicano sulfatado heparina sobre la capacitación in vitro de espermatozoides porcinos fue evaluado mediante la observación de los patrones de fluorescencia con Clortetraciclina (CTC) y por la habilidad de los espermatozoides de experimentar una reacción acrosómica luego de la exposición a ionóforo de calcio. Los espermatozoides incubados durante 120 minutos en condiciones capacitantes (MC) suplementados con 10 μg/ml de heparina mostraron un incremento del número de espermatozoides capacitados (patrón B) y reaccionados sin afectarse su viabilidad, lo que determinó la elección de estas condiciones experimentales para los trabajos siguientes. Los espermatozoides fueron incubados en MC sin albúmina, calcio o bicarbonato o combinaciones en presencia de heparina. En los medios sin calcio o bicarbonato la capacitación fue basal no mostrando variaciones ante la presencia de heparina. En ausencia de albúmina, la presencia de calcio o bicarbonato estimularon la capacitación, que luego se incrementó con el agregado de heparina. Estos resultados sugieren que la heparina aumenta la capacitación in vitro de los espermatozoides de cerdo sólo en condiciones capacitantes. 4. Naturaleza de la interacción de la heparina con el espermatozoide Se evaluó la presencia, topología y dinámica de las proteínas de unión a heparina (HBP) en el espermatozoide de cerdo. La distribución de HBP se analizó mediante fraccionamiento subcelular utilizando heparina biotinilada seguida de una detección colorimétrica. Las HBP fueron detectadas como proteínas pertenecientes a la membrana periacrosomal del espermatozoide del tipo periféricas e integrales. Mediante microscopía de fluorescencia indirecta de espermatozoides incubados con heparina biotinilada se evidenció la unión de heparina al espermatozoide en diferentes estados fisiológicos. Se observaron dos patrones de fluorescencia diferentes (A y B), que probablemente se correspondan con los estados de espermatozoides no capacitados y capacitados, respectivamente; como se estableció mediante la inducción de la reacción acrosómica de espermatozides capacitados con ionóforo de calcio y la observación del aumento de la fosforilación de la proteína p32. En el patron A, predominante en muestras de espermatozoides no tratados, la fluorescencia se localizó en la región posacrosomal; en el patrón B, observado con mayor frecuencia en muestras de espermatozoides incubados en condiciones capacitantes, la fluorescencia ocupó la región acrosomal. Durante la incubación en medio capacitante (TALP), los espermatozoides mostrando el patrón B aumentaron paulatinamente comparados con espermatozoides no incubados o incubados en condiciones no capacitantes indicando que las modificaciones de los patrones de fluorescencia de HBP están probablemente relacionados con la capacitación. Cuando los espermatozoides fueron incubados con 100 μg/ml de heparina biotinilada en presencia o ausencia de heparina no marcada se observó que los sitios de unión a heparina se localizaron principalmente en la región acrosomal del espermatozoide de cerdo de manera específica y saturable. El efecto in vitro de la heparina observado en este trabajo indica que este glicosaminoglucano sulfatado, normalmente presente en el tracto reproductivo femenino podría cumplir un rol importante en el proceso de fecundación en porcinos. No se observaron diferencias cuando espermatozoides no tratados fueron permeabilizados con metanol o tritón antes de la tinción, lo que indica que las HBP se localizan en la superficie espermática. El efecto de la heparina sobre la fosforilación en tirosina de proteínas espermáticas por efecto de la capacitación fue también analizado encontrándose una disminución en la fosforilación de la proteína p32 en presencia de heparina. Esto sugiere que el incremento de la capacitación mediado por este glucosaminoglicano podría involucrar un proceso de señalización celular alternativo o ser el resultado de la pérdida de estas proteínas por efecto de la RA, hecho que se observa aumentado con el agregado de heparina en los medios de incubación. El hallazgo de que la heparina se une al espermatozoide en forma diferencial de acuerdo con su estado fisiológico es una nueva evidencia de la remodelación de la superficie de la membrana por efecto de la capacitación y podría proveer un método útil y relativamente simple para la evaluación in vitro de las modificaciones del estado fisiológico del espermatozoide porcino. 5. Caracterización del rol de la heparina en la unión del espermatozoide a la Zona Pelúcida. Con el fin de evidenciar el efecto de la heparina sobre la unión de los espermatozoides a ZP se utilizó el método del cubreobjetos cubierto de ZP. Al adicionar espermatozoides incubados bajo condiciones capacitantes y en presencia de heparina a los cubreobjetos, el número de espermatozoides unidos fue significativamente menor comparado con aquellos incubados en ausencia de heparina. En los cubreobjetos no tratados, el número de espermatozoides unidos fue mínimo y no varió significativamente a lo largo de todo el proceso de incubación, independientemente de la presencia de heparina. Este resultado se podría explicar considerando el hecho de que la ZP contiene cierto número de dominios polisulfatados que posiblemente competirían con la heparina. La mayoría de las HBP permanecen unidas al espermatozoide después de la capacitación, interviniendo algunas de ellas, como AWN-1 y DQH, en la unión primaria del espermatozoide a la ZP y es a estas proteínas a las que se uniría la heparina, hecho que sugiere que los glucosaminoglicanos de su tipo presentes en el tracto femenino podrían estar implicados en la preselección espermática y así contribuir a la prevención de la polispermia. 6. Las HBP como indicadoras de fecundidad en verracos En este trabajo se procedió a la detección de posibles diferencias en la unión a heparina de muestras de espermatozoides de animales con diferentes grados de fecundidad in vivo. Se procedió a clasificar inicialmente a un grupo de reproductores porcinos, cuyos parámetros de calidad seminal no mostraban diferencias en relación con los valores habituales de normalidad preestablecidos para la especie porcina, en dos grupos (I y II) en función de diferencias en cuanto a su Tasa de Parto (hembras paridas/hembras inseminadas), perteneciendo al grupo I los individuos con una tasa de fecundidad mayor o igual al 70 % y al grupo II, individuos con una tasa menor al 70 %. Muestras de semen de cada individuo fueron evaluadas mediante microscopía de fluorescencia indirecta utilizando la técnica de incubación de espermatozoides previamente incubados en condiciones capacitantes, con heparina biotinilada y revelado con streptavidina-FITC. Se encontraron diferencias significativas en cuanto al porcentaje de espermatozoides que muestran patrón B de fluorescencia en 2 animales pertenecientes al grupo II, los que muestran un porcentaje significativamente menor de fluorescencia en la región acrosomal en todos los tiempos de incubación testeados. Considerando que las HBP AWN-1, AQN-3 y DQH son retenidas en la membrana espermática luego de la capacitación interviniendo como receptores primarios en la unión ovocito-ZP, una disminución en la densidad de estas proteínas sobre la membrana del espermatozoide porcino podría estar reflejada en la disminución en el porcentaje de espermatozoides que unen heparina en la región acrosomal luego de capacitados (patrón B) observada en algunos individuos. En función de los valores de fecundidad inferiores observados para estos mismos animales este resultado estaría identificando, dentro de una población de reproductores aptos para la Inseminación Artificial, una subpoblación de individuos con menor capacidad fecundante (subfecundidad), característica que no se refleja en los análisis comúnmente utilizados para la evaluación de la calidad del semen porcino destinado a la Inseminación Artificial.