Basiglio, Cecilia Lorena2024-03-052024-03-052023https://hdl.handle.net/2133/26756La colestasis es una reducción del flujo biliar que produce acumulación de sales biliares y otros compuestos tóxicos, produciendo injuria hepatocelular, fibrosis y, eventualmente, cirrosis. El estrés oxidativo (EO) es un evento altamente frecuente en las enfermedades colestásicas, donde se generan especies reactivas del oxígeno como consecuencia del daño mitocondrial ocasionado por las sales biliares acumuladas. La bilirrubina (BR), producto final del catabolismo del grupo hemo, contribuye en gran medida a las defensas del organismo y nuestro grupo de trabajo ha demostrado que BR es clave en la preservación de la función hepatobiliar durante la injuria colestásica oxidativa in vitro. Se planteó como objetivo general de esta Tesis evaluar el efecto de la modulación de los niveles endógenos de BR sobre la injuria colestásica oxidativa in vivo en la rata, respondiendo a la hipótesis que postula que las patologías colestásicas tendrían más severas manifestaciones en términos de función hepatobiliar en ausencia de BR. Primero, se evaluó el impacto de la modulación de los niveles hepatocelulares de BR mediante inducción de la enzima hemoxigenasa-1 sobre la colestasis aguda inducida por EO. Aquellos animales sometidos a la injuria oxidativa mostraron niveles más elevados en todos los marcadores de EO ensayados en comparación con el grupo control, mientras que, en animales pretratados con el inductor de hemoxigenasa-1 se obtuvieron valores similares a los controles. Además, la alteración en la función secretora biliar y la internalización de los principales transportadores hepatocanaliculares inducidas por EO fue prevenida por el pretratamiento con el inductor. Para indagar en qué proporción la fracción conjugada de BR ejerce protección en la colestasis inducida por EO, se inhibió específicamente la conjugación de BR, y se encontró que esto no altera la eficiente protección conferida por el pigmento frente al desafío oxidativo. Buscando extrapolar nuestros hallazgos a un contexto más cercano a la fisiopatología humana, se evaluó el papel de la BR en un modelo de injuria hepática oxidativa e inflamatoria sostenida en el tiempo. Los animales se sometieron a ligadura del conducto biliar común y se evaluó el efecto de la inhibición de la generación endógena de BR sobre el establecimiento y la progresión de la injuria hepática, utilizando un inhibidor competitivo de hemoxigenasa-1. Mediante el estudio anatomopatológico de cortes de tejido hepático, se constató el establecimiento de la injuria obstructiva, siendo esta más evidente en el grupo que había recibido, además, el pretratamiento con el inhibidor de hemoxigenasa-1, indicando que la inhibición de la generación endógena de nueva BR agrava la lesión hepática obstructiva. En concordancia, se encontraron niveles de marcadores de EO más elevados en los animales en los que se había inhibido hemoxigenasa-1, demostrando que, en condiciones colestásicas, el daño oxidativo es mayor cuando la producción endógena de BR se ve impedida. Por lo expuesto, concluimos que la modulación de los niveles endógenos de BR impacta en el efecto citoprotector que ejerce el pigmento en situaciones de colestasis de corta y larga duración en el animal entero. Estos hallazgos podrían ser, a futuro, extrapolados a una modulación controlada de los niveles de BR como estrategia terapéutica en colestasis.esembargoedAccessBilirrubinaEstrés oxidativoColestasistesisMartín, Pamela L.Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Cienias Bioquímicas y FarmacéuticasCC BY-NC-ND 2.5 AR DEED Atribución-NoComercial-SinDerivadas 2.5 Argentina