Soncini, Fernando C.2025-08-282025-08-282024https://hdl.handle.net/2133/30058Salmonella enterica es una bacteria patógena responsable de enfermedades como la gastroenteritis y la fiebre entérica, representando un grave desafío para la salud pública global. Un aspecto fundamental de su ciclo de vida es la capacidad de formar biopelículas, comunidades bacterianas adheridas a superficies y rodeadas por una matriz extracelular autoproducida. En Salmonella, la matriz extracelular está compuesta principalmente de la fimbria agregativa curli y el exopolisacárido celulosa. La transición al estilo de vida comunitario y la formación de biopelículas están controladas por el regulador maestro CsgD, cuya expresión es modulada por factores de transcripción que integran diversas señales ambientales. Entre estos reguladores, MlrA y MlrB, dos factores de transcripción de la familia MerR, juegan un papel crucial en la activación de la expresión de CsgD, y también, reprimen el gen orf319, cuya función es desconocida. El objetivo principal de esta tesis fue caracterizar funcionalmente a Orf319, una proteína codificada en la isla de patogenicidad 2 (SPI-2) de Salmonella, para entender su rol en la formación de biopelículas y en la adaptación intracelular. Se evaluó su interacción con otros reguladores y su impacto en la virulencia del patógeno. En el primer capítulo, se analizó la influencia de Orf319 en la formación de biopelículas. Los resultados mostraron que la expresión ectópica de Orf319 activa la producción de componentes de la matriz extracelular al aumentar los niveles de expresión de CsgD. A pesar de que Orf319 estimula la síntesis de biopelículas de manera similar a MlrA, no requiere la presencia de MlrA, MlrB ni otros reguladores ya caracterizados en Salmonella para la activación transcripcional de csgD. Los estudios también revelaron que Orf319 ejerce un efecto negativo sobre su propia transcripción, sugiriendo un mecanismo de retroalimentación controlado, en parte, por MlrB. Orf319 contiene dos dominios conservados, DUF523 y DUF1722. Mutaciones en cisteínas asociadas a la formación de un clúster Fe-S predicho en el dominio DUF523 afectaron la formación de biopelículas y la transcripción de csgD. El segundo capítulo se centró en el papel de Orf319 en la virulencia de Salmonella. La deleción de orf319 no afectó la capacidad de la bacteria para replicarse dentro de macrófagos, pero la sobreexpresión de Orf319 redujo significativamente la replicación intracelular. Esto se debe a su capacidad para promover la formación de biopelículas a través de la regulación de CsgD, ya que el aumento de la producción de celulosa actúa como factor de anti-virulencia en este entorno. Orf319 también se identificó como un regulador negativo de SsrB, el activador de los genes de la SPI-2, aunque su efecto en condiciones intracelulares parece estar contrarrestado por otros mecanismos. Estos hallazgos sugieren que Orf319 podría actuar como un nexo entre la formación de biopelículas y la virulencia en Salmonella.esembargoedAccessSalmonellaBiopelículasVirulenciatesisVitor Horen, LuisinaUniversidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y FarmacéuticasAttribution-NonCommercial 2.5 Argentina